加巴噴丁原料藥及其制劑的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究.pdf

1、加巴噴丁由美國輝瑞公司研制，1993年首次以商品名Neurontin在英國上市。它既可以作為癲癇治療的添加用藥，又可用于部分性癲癇發(fā)作的單一治療，是新一代的γ-氨基丁酸類抗癲癇新藥。加巴噴丁口服吸收迅速，反映出劑量依賴吸收關(guān)系，基本不與血漿蛋白結(jié)合，以原型化合物經(jīng)尿排出，和氨基酸酐清除率相當(dāng)。除良好的藥代動力學(xué)特性外，加巴噴丁無藥物間相互作用，因此在臨床上應(yīng)用廣泛。 目前，我國尚無加巴噴丁的上市，歐美等國家也未在我國申請專利(尚

2、屬西藥二類新藥)，也無有關(guān)加巴噴丁原料藥研究的相關(guān)報道，所以對這一領(lǐng)域的探索和研究就變得十分重要，它將推動我國抗癲癇藥物的發(fā)展。 目的：對加巴噴丁原料藥的理化常數(shù)、性質(zhì)、純度檢查、含量測定等方面進行研究，制定加巴噴丁原料藥的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。 方法： (1)理化性質(zhì)分析溶解度測定：在室溫條件下，稱取一定量的供試品觀察30s內(nèi)在常見溶媒中的溶解情況。 熔點測定：用毛細管法測定。 溶液澄明度和顏色：將供試品在

3、一定條件下溶解后，觀察溶液澄明度和色澤。 分別將供試品進行干燥失重、熾灼殘渣及重金屬檢查。 (2)鑒別反應(yīng)：采用化學(xué)法、紅外分光光度法和反相高效液相色譜法。 (3)有關(guān)物質(zhì)考察：用紫外分光光度法、薄層色譜法、反相高效液相色譜法檢查有關(guān)物質(zhì)。 確定色譜條件：選擇檢測波長，調(diào)整流動相的組成、配比、流速以使加巴噴丁色譜峰分離完全。 色譜系統(tǒng)適用性試驗：調(diào)整色譜流動相使分離度、理論板數(shù)、不對稱因子符合要求

4、。 專屬性試驗：將供試品經(jīng)高溫、酸、堿、光照、氧化破壞性試驗后考察在擬定色譜條件下供試品與其降解產(chǎn)物分離的情況。 分析方法考察：分別進行穩(wěn)定性、重現(xiàn)性試驗，并測定檢測限。 (4)含量測定：采用柱前衍生化反相高效液相色譜法測定加巴噴丁的含量，分別進行色譜條件的確定、色譜系統(tǒng)適用性試驗、線性、穩(wěn)定性、中間精密度、重現(xiàn)性、重復(fù)性、回收率、檢測限試驗，并進行含量測定。 結(jié)果： (1)理化性質(zhì)溶解度測定：加

5、巴噴丁供試品易溶于水、0.1mol/L氫氧化鈉、0.1mol/L鹽酸，略溶于甲醇，微溶于95％乙醇，在氯仿、乙醚不溶。 熔點測定：加巴噴丁的熔點為162.8℃～163.7℃。 溶液澄清度和顏色：加巴噴丁溶液無色、澄清。 干燥失重、熾灼殘渣及重金屬檢查：加巴噴丁干燥失重小于0.5％，熾灼殘渣小于0.1％，重金屬小于百萬分之二十。 (2)鑒別反應(yīng)：加巴噴丁水溶液和茚三酮在加熱條件下生成紫色化合物，溶液顯藍紫色

6、；加巴噴丁供試品的紅外吸收光譜圖、高效液相色譜圖與對照品的圖譜一致。 (3)有關(guān)物質(zhì)檢查：用紫外分光光度法檢查供試品，268nm波長處的紫外吸收小于0.10。用薄層色譜法檢查，供試品色譜圖中只顯主斑點。用高效液相色譜法檢查供試品的雜質(zhì)含量均在0.5％以下。 確定色譜條件：色譜柱為大連依利特C<,18>色譜柱，250mm×4.6mm，5μm；流動相為水-甲醇-乙腈(55：35：10)；流速為1.Oml/min；檢測波長

7、210hm；進樣量為20μl。 色譜系統(tǒng)適用性試驗：供試品溶液的色譜峰與其主峰分離完全，與相鄰色譜峰的分離度大于1.5，理論塔板數(shù)以3，3-亞戊基-γ-丁內(nèi)酰胺計為10335，保留時間為14min左右，不對稱因子為0.92。 專屬性試驗：加巴噴丁對光穩(wěn)定，高溫易分解為3，3-亞戊基-γ-丁內(nèi)酰胺，經(jīng)酸、堿、氧化劑破壞性試驗后，其降解產(chǎn)物均能與主峰實現(xiàn)很好的分離。 分析方法考察：供試品在24h內(nèi)穩(wěn)定，重現(xiàn)性良好，內(nèi)

8、酰胺檢測限為1μg/ml。 (4)含量測定：衍生化試劑為鄰苯二甲醛和3-巰基丙酸，反應(yīng)溫度為室溫，反應(yīng)時間為5分鐘；色譜柱為大連依利特Sinochrom填料為5μm的十八烷基硅烷鍵合硅膠，內(nèi)徑為4.6mm，長度為250mm；流動相為0.33mol/L冰醋酸-甲醇-乙腈(30：70：30)；流速為1.Oml/min；檢測波長340hm；進樣量為20μl；供試品溶液的色譜峰與其主峰分離完全，與相鄰色譜峰的分離度大于1.5，理論塔板數(shù)

9、9080，保留時間為1Omin左右，不對稱因子0.96；加巴噴丁對照品在濃度1.Oμg/ml～12.0μg/ml的范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，回歸方程為Y=0.6840X-0.0947，相關(guān)系數(shù)r=0.9991(n=7)，p<0.01；至少在75min內(nèi)穩(wěn)定；平均回收率為97.65％，RSD為0.61％；檢測限為0.25μg/ml；平均含量為99.80％，RSD為O.11％。 結(jié)論：本文對加巴噴丁原料藥的理化常數(shù)、性質(zhì)、純度檢查、含量測

10、定等方面進行了研究，制定了加巴噴丁原料藥的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。 第二部分加巴噴丁膠囊劑質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究加巴噴丁吸收迅速，表現(xiàn)出劑量依賴關(guān)系，和其他蛋白質(zhì)沒有明顯粘合，無藥物間相互作用，不代謝，以原型化合物經(jīng)尿液排出，清除率和氨基酸酐相等。臨床上廣泛用于各類癲癇發(fā)作的添加用藥和單獨用藥。國外上市的膠囊劑規(guī)格為：100mg，300mg，400mg。根據(jù)膠囊劑的劑型優(yōu)勢和我國臨床用藥的特點，河北省藥物研究所將其制成膠囊劑，規(guī)格為100mg。

11、 目的：建立控制加巴噴丁膠囊質(zhì)量的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。 方法：(1)裝量差異測定：取三批供試品各20粒，測定每粒裝量與平均裝量的差異；(2)選擇溶出介質(zhì)：比較加巴噴丁膠囊在水、0.1mol/L鹽酸中的溶出度，確定合適的溶出介質(zhì)；(3)輔料干擾試驗：配制空白輔料的溶液，在200nm～400nm波長范圍內(nèi)進行光譜掃描，考察輔料有無干擾；(4)溶出度測定：取加巴噴丁膠囊內(nèi)容物，照溶出度法(中國藥典二部附錄XC第一法)操作，將供試品和對照品溶液用

12、茚三酮顯色后在570nm的波長處測定，根據(jù)供試品和對照品二者的吸收度比值計算每粒膠囊的溶出量。(5)分析方法考察：分別進行線性、穩(wěn)定性、重復(fù)性、中間精密度和回收率試驗。(6)溶出曲線及溶出時間的確定：取加巴噴丁膠囊6粒，按溶出度測定法測定每粒在0、1、2、3、5、10、12、15、20、30、40min時的累積溶出率，確定溶出時間。(7)含量測定：采用柱前衍生化HPLC法測定。 結(jié)果：(1)裝量差異測定：測定3批樣品其裝量差異均

13、在-3.5％～3.2％之間。(2)選擇溶出介質(zhì)：采用水為溶出介質(zhì)。(3)輔料干擾試驗：加巴噴丁經(jīng)顯色后在570nm±1nm波長處有最大吸收，而且輔料在此波長處無干擾吸收，故檢測波長選為570nm。(4)分析方法考察：加巴噴丁對照品在濃度4.4μg/ml～17.6μg/ml的范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，回歸方程為Y=0.1166X-0.0031，相關(guān)系數(shù)為r=O.9999(n=5)，p

14、中間精密度均良好；平均回收率為99.72％，RSD為0.17％。(5)溶出度測定：供試品在15min的溶出量均大于90％，確定溶出限度為80％以上。(6)溶出曲線及溶出時間的確定：6粒加巴噴丁膠囊供試品在相同取樣點的溶出度相近，15min后溶出度大于90％，為保證溶出充分，20min后取樣測定。(7)含量測定：供試品的含量均在95.0％～105.0％之間，確定含量限度為標(biāo)示量的95.0％～105.0％。 結(jié)論：本文通過對加巴噴丁