小麥葉片環(huán)狀RNA高通量鑒定及其在干旱脅迫應(yīng)答中的功能初探.pdf

1、小麥（Triticum aestivum）在正常的生長過程中，經(jīng)常受到干旱脅迫的影響。研究表明，非編碼RNA直接或者是間接參加了小麥對干旱脅迫的響應(yīng)。通過高通量測序技術(shù)得知，ckcRNA是一種缺失5'末端帽子和3'末端poly(A)尾巴的具閉環(huán)結(jié)構(gòu)的非編碼RNA。在人類、動物和植物中，circRNA作為miRNA的海綿，以“解除”miRNA對其靶基因的抑制作用。然而，迄今為止沒有關(guān)于干旱脅迫下小麥葉片中circRNA的相關(guān)報告。

2、　　為了探討干旱脅迫下，小麥幼苗葉片中參與調(diào)控的circRNA的數(shù)量及其潛在的功能，本研究首次使用小麥品種矮抗58（Triticum aestivum L.cv.Aikang58）為材料，在充分澆水(CK組)和PEG處理模擬干旱（PEG組）兩種情況下，分別提取出小麥葉片的總RNA，進行了全基因組的circRNA測序，并用生物信息學(xué)工具對數(shù)據(jù)進行分析。
　　本研究在干旱脅迫下，篩選和鑒定了小麥葉片中的circRNA，研究了小麥cir

3、cRNA的差異化表達的模式，推斷了circRNA作為miRNA“海綿”的調(diào)控功能，并對差異化表達的circRNA進行實時定量PCR驗證，預(yù)測了circRNA相對應(yīng)mRNA的功能分類，從而進一步揭示了circRNA在circRNA-miRNA-gene三者的調(diào)節(jié)作用。主要試驗如下:
　　使用PEG模擬干旱對小麥葉片連續(xù)處理5d，小麥幼苗逐漸倒伏，葉片中RWC含量持續(xù)降低，而丙二醛(MDA)和H2O2的含量均持續(xù)增加。小麥為了減緩干旱

4、對自身造成的損傷，小麥幼苗中超氧化物歧化酶(SOD)、過氧化氫酶(CAT)和過氧化物酶(POD)的含量均所有提高。
　　本研究在小麥幼苗葉片中進行了基于circRNA富集文庫的深度測序，鑒定出88種待選circRNA，與對照組相比，其中62種在干旱脅迫中表達差異顯著。
　　在干旱應(yīng)答表達的circRNA中，預(yù)測其中的6種對相應(yīng)的miRNA起到“海綿”作用，并且對這6種circRNA進行了qRT-PCR驗證，有5種的結(jié)果與轉(zhuǎn)錄