20-HETE在血管緊張素Ⅱ引起的心肌細胞凋亡中的作用研究.pdf

1、20-羥二十烷四烯酸(20-hydroxyeicosatetraenoic acid，20-HETE)是細胞色素P450(Cytochrome P450，CYP450)ω-羥化酶催化花生四烯酸(arachidonic acid，AA)代謝所生成的產物。它是一種潛在的血管收縮劑，在腎、腦動脈和心臟的冠脈循環(huán)中起作用，它可以調節(jié)AngⅡ、加壓素和去甲腎上腺素的血管收縮反應。本實驗室的前期研究結果顯示20-HETE能夠引起乳鼠心肌細胞的的凋亡

2、反應，在此研究基礎上，發(fā)現由AngⅡ引起的心肌細胞凋亡，能夠被20-HETE合成酶抑制劑HET0016所抑制，這顯示AngⅡ引起的心肌細胞凋亡可能被20-HETE所介導。方法及結果如下:1）通過流式細胞儀技術檢測發(fā)現，HET0016能夠顯著抑制由AngⅡ引起的心肌細胞凋亡率的提高。與對照組相比，經過AngⅡ(100 nM)處理后的心肌細胞的存活率顯著降低，而凋亡細胞的比率則明顯升高，凋亡細胞的比率約達到35.4±8.5％; HET001

3、6顯著的抑制了AngⅡ引起的心肌細胞凋亡率的提高，使AngⅡ引起的凋亡細胞的比率下降到14.9±2.6％。2）利用激光共聚焦顯微鏡，以JC-1為熒光探針檢測發(fā)現，HET0016能夠顯著抑制由AngⅡ引起的心肌細胞線粒體膜電位的下降;3）利用分光光度法和Hoechst染色發(fā)現，HET0016能夠顯著的抑制AngⅡ引起的Caspase-3活性的升高，并能夠降低AngⅡ引起的細胞核凋亡反應的發(fā)生;4）RT-PCR和Western blot實驗