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文檔簡(jiǎn)介
1、研究背景:
腰椎退行性疾病是中老年人群的常見病,在60歲以上人群其發(fā)病率高達(dá)90%。部分保守?zé)o效的病例需要手術(shù)治療,腰椎后路手術(shù),進(jìn)行椎間盤切除、椎管減壓或椎體節(jié)段間的融合是目前主要的手術(shù)方法。然而,文獻(xiàn)報(bào)道,雖然手術(shù)本身解決了神經(jīng)壓迫等引起的疼痛和功能障礙,但是手術(shù)中對(duì)脊旁多裂肌的醫(yī)原性損傷卻又成為了病人術(shù)后腰背痛和功能障礙的新來源,有時(shí)這種術(shù)后癥狀甚至?xí)^術(shù)前的程度,文獻(xiàn)稱之為“融合病”,或“腰椎術(shù)后失敗綜合征”。因
2、此探討腰椎后路手術(shù)對(duì)腰椎脊旁多裂肌的損傷機(jī)制,并如何減小這種醫(yī)原性的損傷,成為了脊柱外科的一個(gè)重要課題。臨床研究認(rèn)為剝離、牽拉和腰椎節(jié)段間的融合可能是引起術(shù)后多裂肌損傷或萎縮的主要原因,但仍缺乏確切的證據(jù)支持。相關(guān)動(dòng)物研究雖然認(rèn)為牽拉或融合是引起多裂肌損傷或萎縮的重要原因,但仍存在缺陷:(1)未對(duì)剝離因素進(jìn)行相關(guān)研究;(2)缺乏單因素作用的動(dòng)物模型,研究中常將剝離、牽拉和融合相互混雜,相關(guān)結(jié)論存在爭(zhēng)議;(3)相關(guān)損傷和萎縮的機(jī)制尚未闡明
3、。
研究目的:
1.通過動(dòng)物腰椎脊柱相關(guān)解剖的研究,分析腰椎后路術(shù)式多裂肌損傷和萎縮的解剖基礎(chǔ),并制備剝離、牽拉和融合等腰椎后路手術(shù)相關(guān)的單因素作用動(dòng)物模型;
2.通過單因素?fù)p傷動(dòng)物模型觀察,利用影像學(xué)和組織學(xué)方法,術(shù)后不同時(shí)間點(diǎn)觀察多裂肌形態(tài)學(xué)改變,分析多裂肌損傷變化過程和可能的損傷機(jī)制,明確腰椎后路術(shù)后多裂肌損傷的相關(guān)因素;同時(shí)進(jìn)行氧化應(yīng)激相關(guān)指標(biāo)測(cè)量,探討氧化應(yīng)激在多裂肌早期損傷中的作用;
4、
3.通過單因素作用動(dòng)物模型觀察,利用影像學(xué)和組織學(xué)方法,術(shù)后不同時(shí)間點(diǎn)觀察多裂肌形態(tài)學(xué)改變,分析多裂肌損傷后修復(fù)或萎縮過程,明確腰椎后路術(shù)后多裂肌萎縮相關(guān)因素;并通過多裂肌運(yùn)動(dòng)終板活性的觀察,初步探討多裂肌萎縮的可能機(jī)制。
研究方法:
1.取新西蘭大白兔8只,雌雄各4只;通過X線和CT掃描對(duì)腰椎脊柱骨性結(jié)構(gòu)進(jìn)行初步觀察分析;通過MRI影像對(duì)腰椎脊柱旁肌肉分布和結(jié)構(gòu)進(jìn)行初步觀察分析;并根據(jù)影像結(jié)
5、果,對(duì)白兔腰椎脊柱和脊柱旁肌肉進(jìn)行小心解剖,觀察脊柱旁肌肉的分布、走行和神經(jīng)支配;并根據(jù)解剖學(xué)結(jié)果對(duì)腰椎后路術(shù)式單因素作用動(dòng)物模型進(jìn)行設(shè)計(jì)制備。
2.取雄性新西蘭大白兔36只,隨機(jī)分為四組:空白對(duì)照組(A組)、剝離組(B組)、1小時(shí)牽拉組(C組)和2小時(shí)牽拉組(D組),每組9只;分術(shù)后3小時(shí)、48小時(shí)和7天三個(gè)時(shí)間點(diǎn)進(jìn)行觀察研究;MRIT2加權(quán)冠狀位像、組織稱重評(píng)估術(shù)后多裂肌水腫程度;HE染色進(jìn)行多裂肌水腫、出血、壞死和炎
6、性細(xì)胞浸潤(rùn)評(píng)估;NADH-TR染色進(jìn)行肌纖維排列紊亂程度評(píng)估;多裂肌組織MDA、SOD和GSH含量測(cè)定,進(jìn)行氧化應(yīng)激評(píng)估。
3.取雄性新西蘭大白兔72只,隨機(jī)分為六組:空白對(duì)照組(A組)、剝離組(B組)、1小時(shí)牽拉組(C組)、2小時(shí)牽拉組(D組)、前路椎體間植骨融合組(E組)和后外側(cè)橫突間植骨融合內(nèi)固定組(F組),每組12只;分術(shù)后3、6、12和24周四個(gè)時(shí)間點(diǎn)進(jìn)行觀察研究。MRIT1加權(quán)冠狀位像評(píng)估術(shù)后多裂肌脂肪漫潤(rùn)程度
7、;HE染色和Masson染色進(jìn)行多裂肌組織比例(纖維化、脂肪化)評(píng)估;ATP酶染色進(jìn)行纖維分布評(píng)估;乙酰膽堿酯酶染色進(jìn)行神經(jīng)肌肉接頭評(píng)估。
研究結(jié)果:
1.X線和CT結(jié)果顯示白兔腰椎脊柱有7個(gè)椎體,髂嵴最高點(diǎn)大致定位于L6椎體的下部,靠近L6/7椎間盤位置;椎體形態(tài)較長(zhǎng)和窄小,乳突結(jié)構(gòu)較長(zhǎng),橫突向腹側(cè)生長(zhǎng)成角。MRI顯示脊旁肌分布與人體大致類似。可清楚辨認(rèn)多裂肌邊界。解剖學(xué)結(jié)構(gòu)顯示,骶棘肌由內(nèi)向外依次分為多裂
8、肌、最長(zhǎng)肌和髂肋肌,多裂肌與最長(zhǎng)肌之間存在筋膜間隙,容易分離;多裂肌位于棘突和乳突之間,分為表層肌束和深層肌束,表層肌束起于棘突和棘間韌帶,斜向下走行,跨越2-3個(gè)節(jié)段,以腱性組織止于乳突頭內(nèi)側(cè)面、髂嵴后內(nèi)側(cè)靠近骶骨面和骶骨。腰神經(jīng)后大支在椎間孔外側(cè)從腰神經(jīng)根發(fā)出后,向背側(cè)尾側(cè)走行,在橫突上方內(nèi)側(cè)分成三個(gè)分支:外側(cè)支、中間支和內(nèi)側(cè)支,支配下一個(gè)腰椎節(jié)段水平的骶棘?。黄渲袃?nèi)側(cè)支從后支的內(nèi)側(cè)束發(fā)出,向后向下跨過橫突根部和乳突底部,向內(nèi)下橫過
9、椎板,進(jìn)入多裂肌深面,分支支配多裂肌。
2.MRIT2信號(hào)比率、組織稱重和組織病理評(píng)估均顯示:B、D組術(shù)后水腫程度逐漸加重,而C組水腫程度在術(shù)后3小時(shí)達(dá)最大,以后則逐漸減輕,三種方法評(píng)估多裂肌水腫程度有較好的相關(guān)性(P<0.001)。C、D組術(shù)后3小時(shí)發(fā)生了嚴(yán)重的出血,以后逐漸吸收減輕。B、C、D組術(shù)后均發(fā)生了不同程度的肌纖維壞死,排列紊亂和炎性細(xì)胞浸潤(rùn),其中以D組最為嚴(yán)重(P<0.05)。相比A組,B、C、D組術(shù)后整個(gè)觀
10、察期,氧化指標(biāo)MDA均明顯升高(P<0.05),其中術(shù)后3小時(shí)和48小時(shí),D組MDA指標(biāo)明顯高于B、C組(P<0.05),術(shù)后第7天,B、C、D組間則無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異;抗氧化指標(biāo)SOD和GSH含量均明顯降低(P<0.05),其中術(shù)后術(shù)后3小時(shí)和48小時(shí),D組SOD和GSH指標(biāo)明顯低于B、C組(P<0.05),術(shù)后第7天,B、C、D組間則無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
3.A、E、F組術(shù)后多裂肌未發(fā)現(xiàn)明顯的纖維化或脂肪化,神經(jīng)肌肉接頭活性正常,
11、其中F組多裂?、裥屠w維發(fā)生了增生肥大,與A組相比,Ⅰ型纖維比例和橫截面積均顯著增加(P<0.05)。B、C、D組術(shù)后3周和6周主要以纖維化為主,術(shù)后12周和24周則發(fā)生不同程度的脂肪漫潤(rùn)。其中,B組組織學(xué)改變呈逐漸加重趨勢(shì),術(shù)后24周,整體組織區(qū)域大部分為脂肪組織取代;AchE染色可見明顯的終板退變,至術(shù)后24周只可見殘留個(gè)別的正常運(yùn)動(dòng)終板,大部分已經(jīng)無法辨認(rèn),說明B組術(shù)后發(fā)生了明顯的失神經(jīng)改變。C、D組術(shù)后多裂肌纖維發(fā)生了再生和重塑,
12、術(shù)后纖維化程度逐漸減輕,損傷的運(yùn)動(dòng)終板逐漸恢復(fù),新生的肌纖維排列成整齊的肌束,術(shù)后24周,可見部分區(qū)域?yàn)橹窘M織浸潤(rùn);整個(gè)觀察期,C組纖維化、脂肪化和運(yùn)動(dòng)終板退變均明顯輕于D組(P<0.05)。
研究結(jié)論:
1.脊旁肌的分布和結(jié)構(gòu),為本課題研究模型的準(zhǔn)確制備提供了解剖學(xué)基礎(chǔ);對(duì)文獻(xiàn)報(bào)道的一些模型制備的方法進(jìn)行了修正,并對(duì)模型不相關(guān)的干擾因素進(jìn)行了分析;同時(shí)對(duì)多裂肌的準(zhǔn)確定位和神經(jīng)支配的研究,有助于標(biāo)本的準(zhǔn)確取
13、材和損傷相關(guān)因素的分析。
2.腰椎后路手術(shù)中,剝離和牽拉是引起多裂肌損傷的主要原因;牽拉性損傷與牽拉持續(xù)時(shí)間密切相關(guān),連續(xù)牽拉2小時(shí)可引起多裂肌術(shù)后的嚴(yán)重?fù)p傷,而間斷放松牽拉可明顯減輕多裂肌的損傷;炎性細(xì)胞的浸潤(rùn)和氧化應(yīng)激是引起術(shù)后多裂肌繼發(fā)性損傷的重要原因。
3.剝離是引起腰椎后路術(shù)后多裂肌萎縮的最主要原因;術(shù)中神經(jīng)損傷和術(shù)后失神經(jīng)支配,可能是剝離致多裂肌萎縮的主要原因。牽拉性損傷術(shù)后均可得到不同程度的恢復(fù)
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