基質金屬蛋白酶-8及其抑制劑在成人原發(fā)性腹股溝疝腹橫筋膜中的表達及意義.pdf

1、背景與目的：
　　腹股溝疝是普外科常見的疾病之一,其發(fā)病因素很多,許多情況下并非單一的因素所致,而是由多種因素共同作用的結果。引起腹股溝疝(尤其是成人腹股溝疝)發(fā)生的確切機制目前還不十分清楚。學術界廣泛認為腹股溝疝的致病因素主要是:①腹壁強度降低(鞘狀突未閉、腹橫筋膜的薄弱);②腹內壓增高。其中腹橫筋膜的薄弱在成人原發(fā)性腹股溝疝的形成中起著十分關鍵的作用。
　　目前,有越來越多的學者注意到結締組織代謝異常與腹股溝疝發(fā)生發(fā)展的

2、關系,相繼有研究結果報告基質金屬蛋白酶(matrix metalloproteinases,MMPs)及其組織抑制因子(tissue inhibitor of matrix metallo-proteinases,TIMPs)參與了腹股溝疝的發(fā)生發(fā)展過程。MMPs及其抑制因子TIMPs是參與膠原代謝、調節(jié)細胞外基質代謝平衡最重要的酶類。MMPs是一組主要由成纖維細胞等合成和分泌的Zn2+依賴內肽酶,幾乎能降解細胞外基質(extracel

3、lularmatrix,ECM)的所有成分。MMPs目前已發(fā)現(xiàn)有20余種,構成MMPs家族,具有高度同源性,一般認為,MMP-1、MMP-8、MMP-13參與了Ⅰ、Ⅲ型膠原纖維的代謝,主要與新合成的膠原纖維的交聯(lián)和成熟有關,且參與疝的發(fā)生。TIMPs是近年來發(fā)現(xiàn)的MMPs天然抑制劑,可通過與MMPs不可逆結合發(fā)揮抑制作用,防止ECM的降解,在正常ECM重建和各種病理過程中發(fā)揮重要作用。在多數(shù)情況下TIMPs與活化的MMPs按1∶1結合,

4、從而阻止MMPs與底物的結合,導致MMPs失活?？梢钥闯?MMPs及其抑制物TIMPs之間的平衡對維持膠原的穩(wěn)定意義重大,在腹股溝疝的發(fā)生中起一定的作用。
　　目前,MMPs和TIMPs在腹股溝疝中的實驗研究非常少,而且其研究結果有待于進一步得到證實。本研究應用免疫組織化學SP法,對比分析參與ECM(尤其是膠原成分)代謝平衡的主要酶類MMP-8及TIMP-1在成人腹股溝疝及無疝患者腹橫筋膜組織中的表達情況,從代謝方面進一步探討膠原

5、代謝酶在成人腹股溝疝形成中的作用。該實驗結果將為進一步研究腹股溝疝發(fā)病的分子機制提供理論基礎,并為臨床科學有效的治療提供理論指導。
　　材料與方法：
　　腹股溝疝發(fā)生組(實驗組)45例來自于2007年7月至2008年7月在鄭大一附院疝和腹壁外科實施原發(fā)性腹股溝疝修補手術男性患者,取材部位為腹股溝管后壁腹橫筋膜。非疝發(fā)生組(對照組)取自2007年7月至2008年7月,在鄭州大學第一附屬醫(yī)院接受下腹部手術的無腹股溝疝的患者10例

6、,取材部位為下腹壁腹橫筋膜。所有標本經甲醛固定并作石蠟切片,應用免疫組織化學SP法測定MMP-8及TIMP-1蛋白的表達情況。依照細胞著色密度和著色強度半定量評分法對組織免疫組化染色結果進行評分,以≥1分視為陽性。采用SPSS13.0統(tǒng)計軟件包對實驗數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計學處理。分類變量資料采用x2檢驗或Fisher’s精確概率檢驗,相關性分析采用spearman等級相關。P≤0.05為有統(tǒng)計學差異。
　　結果：
　　1.MMP-8和

7、TIMP-1在各組中均有陽性表達,陽性反應為棕黃色顆粒,定位成纖維細胞于胞漿。
　　2.MMP-8和TIMP-1在實驗組中的表達與對照組相比均有統(tǒng)計學差異(P<0.05)。MMP-8在實驗組中的表達率(P=62.2％)高于對照組(P=20.0％),而TIMP-1在實驗組中的表達率(P=42.2％)低于對照組(P=90.0％)。
　　3.MMP-8在成人原發(fā)性腹股溝疝腹橫筋膜組織中的表達與年齡、疝分型及是否長期吸煙有關(p<0

8、.05),而與腹股溝疝分類及單或雙側發(fā)生疝無明顯相關(p>0.05)。
　　4.TIMP-1在成人原發(fā)性腹股溝疝腹橫筋膜組織中的表達與腹股溝疝患者的年齡、疝分型有關(p<0.05),而與腹股溝疝分類、單或雙側發(fā)生疝及是否長期吸煙無明顯相關(p>0.05)。
　　5.MMP-8和TIMP-1在原發(fā)性腹股溝疝腹橫筋膜組織中表達呈負相關性(r=-0.355,p=0.017)。
　　結論：
　　1.MMP-8在實驗組中的

9、表達增高,與對照組比較有統(tǒng)計學意義。且發(fā)現(xiàn)MMP-8與年齡和疝分型成正相關,年齡越大,MMP-8表達越高;提示MMP-8的表達與組織的老化有關。MMP-8在Ⅲ型腹股溝疝腹橫筋膜組織中的表達高于Ⅰ~Ⅱ型,且具有統(tǒng)計學意義。MMP-8蛋白在抽煙組中呈高表達,與非長期抽煙組比較差異有統(tǒng)計學意義。提示抽煙可能促進MMP-8的表達。
　　2.TIMP-1在實驗組中的表達降低,與對照組比較有統(tǒng)計學意義。且發(fā)現(xiàn)TIMP-1與年齡和疝分型成負相關