陰溝腸桿菌耐藥性分析與產(chǎn)β-內(nèi)酰胺酶及質(zhì)粒介導(dǎo)基因型檢測研究.pdf

1、目的：1.了解我院2008年1月-2014年12月陰溝腸桿菌的臨床感染分布及對常用抗生素的耐藥情況，為臨床合理使用抗生素提供參考。2.明確我院陰溝腸桿菌產(chǎn)超廣譜β-內(nèi)酰胺酶（ESBLs）和頭孢菌素酶（AmpC酶）及質(zhì)粒介導(dǎo)耐藥基因的分布情況，初步探討我院陰溝腸桿菌的耐藥機(jī)制。3.了解我院陰溝腸桿菌耐藥株的分子流行病學(xué)特征,為進(jìn)一步指導(dǎo)臨床有效控制耐藥菌株在醫(yī)院內(nèi)的傳播提供依據(jù)。
　　方法：1.采用WHONET5.6軟件對7年間陰溝

2、腸桿菌株的標(biāo)本來源、感染科室、年齡分布及耐藥狀況進(jìn)行回顧性統(tǒng)計分析；2.收集我院2013年6月-2014年6月臨床分離的非重復(fù)陰溝腸桿菌株共174株進(jìn)行如下檢測：①采用多底物協(xié)同-拮抗法（MSSAT）對其進(jìn)行 ESBLs和AmpC酶的表型檢測；②PCR擴(kuò)增質(zhì)粒介導(dǎo)的ESBLs基因（TEM-1、SHV-12、CTX-M-3、SFO-1、VEB-3）、AmpC酶基因（ACT-1、DHA-1）和喹諾酮類耐藥（qnr）基因（qnrA、qnrB、

3、qnrS）；③應(yīng)用腸桿菌科重復(fù)一致序列(ERIC)法對攜帶耐藥基因菌株進(jìn)行分子流行病學(xué)研究,確定耐藥菌株間的親緣關(guān)系。
　　結(jié)果：1.耐藥性分析結(jié)果顯示：7年間，陰溝腸桿菌對哌拉西林的耐藥率最高（44.0％~69.0%）；對亞胺培南耐藥率最低（＜8.0%）；2009-2013年，除了頭孢曲松、亞胺培南、復(fù)方新諾明、替卡西林/克拉維酸、哌拉西林/他唑巴坦外，陰溝腸桿菌對其余10種抗生素的耐藥率逐漸下降(P＜0.05)；在各標(biāo)本來源中

4、，分泌物在陰溝腸桿菌中的絕對檢出率最高；7年間共分離出1596株陰溝腸桿菌，以呼吸道標(biāo)本、分泌物、尿液標(biāo)本為主，尿液中的陰溝腸桿菌對抗菌藥物的耐藥率最高；臨床感染科室主要集中在外科、內(nèi)科、重癥監(jiān)護(hù)病房（ICU），ICU的耐藥率最高；從年齡組看，感染對象以成年和老年患者居多，老年人耐藥率最高，兒童組耐藥率最低。2.MSSAT結(jié)果顯示：174株陰溝腸桿菌中，單產(chǎn)AmpC酶92株（52.87%）,單產(chǎn)ESBLs1株（0.57%），產(chǎn)AmpC酶

5、+ESBLs54株(31.03%)，不產(chǎn)酶27株(15.52%)；陰溝腸桿菌產(chǎn)酶株的耐藥率明顯高于不產(chǎn)酶株(P＜0.05)，同時產(chǎn) AmpC酶+ESBLs菌株的耐藥率高于單產(chǎn)AmpC酶株的耐藥率(P＜0.05)；產(chǎn)AmpC酶+ESBLs菌株對頭孢曲松，頭孢噻肟的耐藥率高達(dá)98.1%與96.3%，對青霉素類的哌拉西林高達(dá)92.5%，單環(huán)類的氨曲南耐藥率為88.9%，對阿米卡星耐藥率較低（15.1%），對亞胺培南敏感。3.PCR結(jié)果顯示：1

6、74株陰溝腸桿菌中，攜帶質(zhì)粒介導(dǎo)的β-內(nèi)酰胺酶基因71株,ESBLs基因檢出率為31.03%（54/174），43株TEM-1、22株SHV-12、21株CTX-M-3、12株SFO-1、1株VEB-3；AmpC酶基因檢出率為21.26%（37/174)，22株DHA-1，17株ACT-1；71株β-內(nèi)酰胺酶基因陽性菌中，僅含一種β-內(nèi)酰胺酶基因的共30株，其余41株均為含兩種或兩種以上β-內(nèi)酰胺酶基因。qnr耐藥基因檢出率為27.01

7、%（47/174），qnrA16株，qnrB25株，qnrS15株,其中，有9株陰溝腸桿菌同時檢測到兩種qnr基因；含ESBLs和（或）AmpC酶基因陽性菌株較耐藥基因陰性株更易同時攜帶qnr基因(P＜0.05)。4.ERIC法將70株攜帶耐藥基因的陰溝腸桿菌分為24型，主要的型別為X型（18株）、V型（9株）、W型（6株）。
　　結(jié)論：1.陰溝腸桿菌對臨床常用抗菌藥物的耐藥率呈下降趨勢，對于碳青霉烯類抗生素不敏感菌株的出現(xiàn)應(yīng)引起