組蛋白去乙酰化酶抑制劑對腎細胞癌增殖及凋亡影響.pdf

1、第一部分組蛋白去乙?；冈趪四I透明細胞癌患者中的分布及表達意義
　　 目的：組蛋白去乙?；?Histone deacetylase，HDAC)的活性增加會導(dǎo)致實體性腫瘤更具有侵襲性及促進腫瘤進展。為了了解組蛋白去乙?；敢种苿?HDACinhibitors)對腎細胞癌的抗腫瘤活性，需要首先了解國人腎細胞癌中HDAC表達情況，因此本實驗研究HDAC在國人腎透明細胞癌組織標(biāo)本中的表達水平及活性，以檢驗HDAC抑制劑對我國腎細胞癌

2、患者的適用性，為HDACi藥物的選擇提供依據(jù)。
　　 方法：應(yīng)用蛋白印跡技術(shù)檢測36例腎透明細胞癌及周圍正常對照組織中的HDAC1～HDAC3的表達，酶活性試劑盒檢測腎透明細胞癌和周圍正常對照腎組織中HDAC的活性，統(tǒng)計學(xué)分析腫瘤及周圍正常對照組織中酶活性及表達的差異。
　　 結(jié)果：國人腎透明細胞癌組織標(biāo)本中存在HDAC高表達，HDAC1，HDAC2，HDAC3表達率分別為86.1％，88.9％，66.7％；同時，腎透明

3、細胞癌組織標(biāo)本中HDAC的酶活性明顯高于周圍正常對照腎組織，平均增加了81.9％(p<0.0001)；其表達與患者年齡、腫瘤分級、分期無相關(guān)性，且HDAC1，2，3之間的表達也無明顯的相關(guān)性(p>0.05)。
　　 結(jié)論：HDAC1，HDAC2，HDAC3在國人腎透明細胞癌組織標(biāo)本中存在高表達，提示了HDACi對國人腎透明細胞癌患者有治療可能性。
　　 第二部分組蛋白去乙?；敢种苿㏕SA及MS-275對腎細胞癌增殖及凋

4、亡影響
　　 目的：研究組蛋白去乙?；敢种苿?HDACi)MS-275及TSA對腎腫瘤細胞的殺傷作用，探討其對腎細胞癌的細胞凋亡的影響。
　　 方法：將人腎細胞癌ACHN細胞分成不加藥對照組和不同劑量(0.5、1.0、2.0、4.0、8.0umol/1)MS-275加藥組及(0.05、0.1、0.2、0.4.、0.8umol/l)TSA加藥組，藥物分別作用24h、48h、72h后，MTT法測定MS-275及TSA對AC

5、HN的生長抑制作用，流式細胞儀檢測細胞凋亡情況，倒置相差顯微鏡觀察細胞形態(tài)改變，蛋白印跡試驗檢測腎腫瘤細胞系A(chǔ)CHN內(nèi)的組蛋白3(Histone3)的乙?；?。
　　 結(jié)果：MS-275及TSA呈劑量及時間依賴性殺傷ACHN細胞，MS-275濃度8umol/l，作用時間72h，ACHN抑制率達到了59.6％，TSA濃度0.8umol/l，作用時間72h，ACHN抑制率為51％，MS-275及TSA組凋亡率較對照組明顯(p<0.