姜黃素對卵巢癌細(xì)胞增殖、凋亡的影響及其分子機(jī)制的研究.pdf

1、華中科技大學(xué)碩士學(xué)位論文姜黃素對卵巢癌細(xì)胞增殖、凋亡的影響及其分子機(jī)制的研究姓名：鄭麗端申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：病理學(xué)與病理生理學(xué)指導(dǎo)教師：吳翠環(huán)20040401華中科技大學(xué)同濟(jì)醫(yī)學(xué)院碩士學(xué)位論文姜黃素對卵巢癌細(xì)胞增殖、凋亡的影響及其分子機(jī)制的研究中文摘要【目的】探討姜黃素對人類卵巢癌的體外治療效應(yīng)及其分子機(jī)制?！痉椒ā?1)10pmol／L50pJnol／L姜黃素作用于人卵巢癌細(xì)胞株A27806h24h后，MTT比色法檢測癌細(xì)胞增殖活

2、性，倒置顯微鏡下觀察癌細(xì)胞形態(tài)學(xué)變化，流式細(xì)胞儀技術(shù)分析細(xì)胞周期時相；(2)采用流式細(xì)胞儀、DNALadder、透射電鏡、末端TdT酶標(biāo)記技術(shù)、吖啶橙一溴化乙啶熒光染色法檢測姜黃素對卵巢癌細(xì)胞的誘導(dǎo)凋亡效應(yīng)及其比率。(3)采用免疫組織化學(xué)sP法檢測姜黃素對卵巢癌細(xì)胞Bcl2、P53、MDM2、Caspase3、NF—xB(P65)蛋白表達(dá)的影響。【結(jié)果】(1)10plnol／L50pmol／L姜黃素作用6h24h后，A2780細(xì)胞生長抑

3、制率為6205％一8924％，并呈時間、濃度依賴性特點(diǎn)；部分癌細(xì)胞體積縮小，形態(tài)變不規(guī)則，卵圓形細(xì)胞居多：A2780細(xì)胞發(fā)生G。／G。期阻滯。(2)A2780細(xì)胞經(jīng)109mol／L一509mol／L姜黃素分別作用12h后，在DNA直方圖上可見明顯的“亞G1期”凋亡峰，峰值大小隨藥物濃度增加而遞增；在瓊脂糖凝膠電泳圖上可見180—200bp大小的“梯型”條帶；透射電鏡下可見部分細(xì)胞呈現(xiàn)較為典型的凋亡形態(tài)學(xué)改變；細(xì)胞凋亡率為641％2848

4、％(Po01)。(3)各濃度的姜黃素作用12h后，細(xì)胞爬片上卵巢癌細(xì)胞中Bcl一2、P53蛋白表達(dá)下調(diào)(P001)，并呈濃度依賴性，而MDM2蛋白表達(dá)水平無明顯變化。同時，癌細(xì)胞中NF—xB蛋白(P65)表達(dá)下調(diào)、Caspase一3水平上調(diào)，并呈時間和濃度依賴性fPo01)?！窘Y(jié)論】姜黃素能通過降低癌細(xì)胞增殖活性、阻滯細(xì)胞于co／6。期等機(jī)制顯著抑制卵巢癌細(xì)胞株A2780的體外生長活性；通過下調(diào)Bcl一2、P53、NF—xB基因表達(dá)，上