生長(zhǎng)激素和胰島素樣生長(zhǎng)因子—1對(duì)小鼠卵母細(xì)胞體外成熟及胚胎發(fā)育的影響.pdf

1、目的：探討生長(zhǎng)激素(GH)和胰島素樣生長(zhǎng)因子-1(IGF-1)對(duì)小鼠未成熟卵母細(xì)胞體外成熟(IVM)的影響。 方法：頸椎脫臼法處死小鼠，取出未成熟卵母細(xì)胞，隨機(jī)分為四組，以15～20枚/孔的密度培養(yǎng)于四組含有不同藥物的96孔培養(yǎng)板中，每孔加入90μlα-MEM。組1，10％FCS、0.075U/mlFSH、0.05U/mlhCG；組2，50ng/mlIGF-1，其余同組1；組3，100ng/mlGH，其余同組1；組4，50ng/

2、mlIGF-1、100ng/mlGH，其余同組1。在37℃、5％C02的培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)24小時(shí)，培養(yǎng)結(jié)束后立即在相差顯微鏡下觀察卵母細(xì)胞成熟情況，以生發(fā)泡破裂和第一極體的排出作為觀察指標(biāo)，將結(jié)果分為GVBD組和MⅡ組，僅分析MⅡ組體外受精和胚胎發(fā)育結(jié)果。結(jié)果行卡方檢驗(yàn)，比較各組之間卵母細(xì)胞成熟率、受精率、囊胚形成率有無差異。結(jié)果：實(shí)驗(yàn)共采卵625枚，IVM后成熟459例，受精276例，囊胚形成101例。培養(yǎng)液中添加IGF-1時(shí)，與組1比較

3、卵的成熟和受精結(jié)果差異無顯著性，僅2-細(xì)胞率有明顯提高(75.93％vs57.14％，P＜0.05)。在培養(yǎng)液中添加GH的組3和組4卵的成熟率顯著提高(P＜0.01和P＜0.05)，分別是84.11％和78.46％；囊胚形成率也有明顯提高(P＜0.05)，分別是40.70％和42.42％。 結(jié)論：添加GH可顯著提高IVM成熟率、受精率和囊胚形成率；添加IGF-1僅能提高受精后2-細(xì)胞率，對(duì)卵的成熟率無影響；聯(lián)合應(yīng)用后卵的成熟率、