CD147在親環(huán)素A誘導(dǎo)Jurkat細(xì)胞增殖、活化和趨化過(guò)程中的作用.pdf

1、目的: 研究CD147分子在親環(huán)素A(CyPA)誘導(dǎo)的人T系白血病細(xì)胞株Jurkat細(xì)胞增殖、活化和趨化過(guò)程中的作用，旨在明確CyPA在Jurkat細(xì)胞中可能的作用及機(jī)制，并探討CyPA和CD147分子的相互作用對(duì)腫瘤細(xì)胞生物學(xué)行為的影響。 方法: 1.采用RT-PCR法檢測(cè)轉(zhuǎn)染CD147siRNA的Jurkat細(xì)胞(已構(gòu)建)CD147 mRNA水平，證實(shí)轉(zhuǎn)染的有效性； 2.以不同濃度CyPA(0.01n

2、M，0.1nM，1nM，10nM)處理Jurkat細(xì)胞24 h和48 h，采用四甲基偶氮唑鹽(MTT)法檢測(cè)CyPA的促細(xì)胞增殖作用；以最佳CyPA作用濃度處理Jurkat、Jurkat-vector和Jurkat-CD147siRNA細(xì)胞，檢測(cè)CD147siRNA轉(zhuǎn)染對(duì)CyPA促細(xì)胞增殖的影響； 3.以10nM CyPA處理Jurkat、Jurkat-vector和Jurkat-CD 147siRNA細(xì)胞24 h，采用流式細(xì)胞

3、儀法檢測(cè)CyPA處理前后細(xì)胞表面活化標(biāo)記分子CD25的表達(dá)； 4.采用Transwell小室法檢測(cè)CyPA趨化Jurkat、Jurkat-vector和Jurkat-CD147siRNA細(xì)胞的能力； 結(jié)果: 1.CD147siRNA轉(zhuǎn)染有效，Jurkat-CD147siRNA細(xì)胞的CD147mRNA表達(dá)水平較Jurkat細(xì)胞顯著下降，抑制率為67.12％(P<0.05)； 2.CyPA以濃度依賴性方式促進(jìn)

4、Jurkat細(xì)胞增殖，CyPA濃度為0.1nM時(shí)開(kāi)始促細(xì)胞增殖，10nM時(shí)促增殖作用最強(qiáng)；CD147siRNA轉(zhuǎn)染導(dǎo)致CyPA促細(xì)胞增殖作用顯著下降，以Jurkat+CyPA組為對(duì)照，Jurkat-CD147siRNA+CyPA組在24 h和48 h時(shí)的增殖抑制率分別為38％和27％，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均<0.05)； 3.CyPA可促進(jìn)Jurkat細(xì)胞的活化，CyPA處理前后的CD25陽(yáng)性表達(dá)率分別為6.28％和7.75％(

5、P<0.05)；CD147siRNA轉(zhuǎn)染致CyPA促細(xì)胞活化能力下降，Jurkat-CD147siRNA+CvPA組和Jurkat+CyPA組的CD25陽(yáng)性表達(dá)率分別為3.51％和7.75％，有顯著性差異(P<0.05)； 4.CyPA對(duì)Jurkat細(xì)胞有趨化作用，CyPA趨化組與對(duì)照組趨化細(xì)胞數(shù)分別為67611±4148和29056±3643，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；CyPA趨化Jurkat-CD147siRNA的細(xì)