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1、目的:觀察人趨化素樣因子1(human chemokine-like factor1,hCKLF1)對(duì)人動(dòng)脈血管平滑肌細(xì)胞(arterial smooth muscle cells,ASMCs)的趨化和增殖作用。 方法:收集用hCKLF1真核細(xì)胞表達(dá)載體瞬時(shí)轉(zhuǎn)染293T細(xì)胞72小時(shí)后的上清培養(yǎng)液,采用細(xì)胞遷移實(shí)驗(yàn)檢測(cè)hCKLF1對(duì)人ASMCs的趨化作用。分別用轉(zhuǎn)染上清刺激人ASMCs24,48,72小時(shí),用微量細(xì)胞培養(yǎng)噻唑藍(lán)(m
2、ethyl thiazolyl tetrazolium,MTT)法檢測(cè)其對(duì)人ASMCs是否具有促增殖作用。 結(jié)果:1、0倍和10倍稀釋的上清培養(yǎng)液實(shí)驗(yàn)組遷移細(xì)胞數(shù)與對(duì)照組遷移細(xì)胞數(shù)相比,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(0倍稀釋P<0.05,10倍稀釋P<0.01)。100倍和1000倍稀釋的上清培養(yǎng)液實(shí)驗(yàn)組遷移細(xì)胞數(shù)和對(duì)照組的遷移細(xì)胞數(shù)相比,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。平滑肌細(xì)胞分別被不同濃度百日咳毒素(pertussis toxin,
3、PTX)處理,PTX濃度為0μg/l和2μg/l時(shí),10倍稀釋的上清培養(yǎng)液實(shí)驗(yàn)組遷移細(xì)胞數(shù)與對(duì)照組遷移細(xì)胞數(shù)相比,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。PTX濃度為10μg/l,10倍稀釋的上清培養(yǎng)液實(shí)驗(yàn)組遷移細(xì)胞數(shù)與對(duì)照組遷移細(xì)胞數(shù)相比,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。2、MTT結(jié)果顯示吸光度值:實(shí)驗(yàn)組24小時(shí)OD490=0.339±0.015與對(duì)照組OD490=0.335±0.018相比,差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。48小時(shí)實(shí)驗(yàn)
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