人重組粒細(xì)胞集落因子對(duì)急性腦缺血大鼠的腦保護(hù)作用及功能可塑性研究.pdf

1、[研究背景] 急性缺血性腦梗死是神經(jīng)系統(tǒng)常見病、多發(fā)病，其致殘率極高，已成為嚴(yán)重的醫(yī)學(xué)和公共衛(wèi)生問題，急性腦梗死后如何減少殘死率，促進(jìn)神經(jīng)功能恢復(fù)，提高病人生活質(zhì)量是當(dāng)前的重要任務(wù)。 [目的] 本研究以線栓法復(fù)制大鼠急性缺血性腦梗死模型，應(yīng)用HE染色、免疫組織化學(xué)及分子生物學(xué)等方法，觀察rhG—CSF在實(shí)驗(yàn)?zāi)Ｐ椭械哪X保護(hù)和功能重塑作用，探討其治療缺血性腦卒中的可行性，為臨床提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 [方法]

2、 健康雄性WISTAR大鼠，體重270～290g，完全隨機(jī)法進(jìn)行分組，分為假手術(shù)組，缺血組和藥物組，各組又分為1d、4d、7d、10d四個(gè)時(shí)間段，共12組，每組9只，共用大鼠108只。采用koizumi線栓法制作缺血模型，藥物組皮下注射rhG—CSF，假手術(shù)組和缺血組注射生理鹽水作為對(duì)比。觀察記錄大鼠急性缺血性腦梗死后，各時(shí)間段組間動(dòng)物神經(jīng)功能改變，并用TTC染色法測(cè)定腦梗死面積、HE染色法行病理組織學(xué)檢查，評(píng)價(jià)rhG—CSF腦保護(hù)作用

3、和減輕大腦病理組織學(xué)損害的程度；RT—PCR法檢測(cè)腦組織內(nèi)神經(jīng)生長相關(guān)蛋白(GAP-43)mRNA表達(dá)，及免疫組化法檢測(cè)血管內(nèi)皮細(xì)胞生長因子(VEGF)、S-100β蛋白表達(dá)的變化，以探討rhG—CSF對(duì)神經(jīng)、血管再生的影響及減輕生化損害的程度。 [結(jié)果] 1、病理組織學(xué)：假手術(shù)組未見明顯異常；缺血組顯示神經(jīng)元細(xì)胞核崩解，胞質(zhì)水腫，膠質(zhì)細(xì)胞增生等；藥物組觀察到神經(jīng)細(xì)胞及膠質(zhì)細(xì)胞增生明顯；1d時(shí)即有大的神經(jīng)前體細(xì)胞移向缺血

4、區(qū)；4d時(shí)血管周圍淋巴細(xì)胞浸潤，形成淋巴套；7d血管密度增高；10d時(shí)淋巴細(xì)胞減少； 2、藥物組神經(jīng)功能缺損癥狀較缺血組少(p＜0.05)，假手術(shù)組未見神經(jīng)功能缺損； 3、假手術(shù)組可見少量S-100β表達(dá)，缺血組明顯增加，藥物組有所增加，而缺血組增加更為明顯(p＜0.05)； 4、缺血組及藥物組1-10天GAP-43均呈增高趨勢(shì)，二組各時(shí)間表達(dá)量均有區(qū)別(P＜0.01)； 5、缺血組VEGF表達(dá)1-10天

5、內(nèi)緩慢增高；藥物組上調(diào)VEGF表達(dá)，1-4天逐漸增高，4天時(shí)達(dá)到高峰，4-10天有降低趨勢(shì)；1-7天表達(dá)量均高于缺血組，10天時(shí)與假手術(shù)組相比仍有差別。 [結(jié)論] 1、rhG—CSF能減少梗死大鼠的腦梗死體積，降低神經(jīng)功能損害； 2、rhG—CSF減少S-100β含量，減輕膠質(zhì)細(xì)胞損傷，間接發(fā)揮腦保護(hù)作用。 3、rhG—CSF能促使GAP-43 mRNA表達(dá)增強(qiáng)和表達(dá)時(shí)間延長，促進(jìn)神經(jīng)軸突再生，有助于中樞