重組人粒細胞集落刺激因子對局灶性腦缺血保護作用機制的研究.pdf

1、本論文常用縮略詞表重組人粒細胞集落刺激因rcolonystimulatingrhGCSF骨髓基質細胞腦源性神經營養(yǎng)因子5澳2脫氧尿曹神經膠質兀纖維酸性蛋自神經功能缺損評分大腦中動脈阻斷a一微管蛋白一III神經絲神經元特異性烯醇化酶recombinanthumangranulocytefactorbonemarrowstromalcellsbrainderivedneurotrophicfactor5bromodeoxyuridinegl

2、ialfibrillaryacidicproteinNeurologicalseverityscoresmiddlecerebralarteryocclusionRtubulinIIIneurofilamentneurospecificenolaseBDNFBrd1JNSSIlFsEpNN盆皿大母博士番文摘妻組(P0.05)。對照組第21天已無明顯纖維結合蛋自免疫陽性細胞，而此時干預組腦缺血周邊區(qū)仍有少量的纖維結合蛋白免疫陽性細胞。干預

3、組第71421天腦缺血周邊區(qū)BDNF免疫陽性細胞數(shù)分別為25.1015.7016.78士3.7512.13土3.67對照組為18.2014.5011.7012.936.9212.53干預組的BDNF免疫陽性細胞數(shù)明顯多于對照組(P0.05)。干預組第7天Bcl2免疫陽性細胞數(shù)為24.92士3.35對照組為19.1012.Ol干預組的Bcl2免疫陽性細胞數(shù)明顯多于對照組(P0.05).此外，千預組第7天腦缺血周邊區(qū)的血管結構周圍觀察到呈簇

4、狀分布的纖維結合蛋白免疫陽性細胞。干預組第7天和對照組第7天腦缺血周邊區(qū)均觀察到抗Brdu抗纖維結合蛋白、抗GFAP抗纖維結合蛋白和抗nestin十抗BDNF免疫雙陽性細胞干預組第7天的缺血周邊區(qū)觀察到抗Brdu抗BDNF免疫雙陽性細胞。第二部分纖維結合蛋白對缺糖、缺氧海馬腦片的保護作用本研究第一部分觀察到rhGCSF可增加腦缺血周邊區(qū)纖維結合蛋白的表達。本部分擬觀察直接運用纖維結合蛋白對缺糖、缺氧海馬腦片的保護作用。進一步證明rhGC

5、SF改善神經功能的機制。分離、解剖新生SD大鼠的海馬結構，經切片后培養(yǎng)。取培養(yǎng)9天、生長良好的海馬腦片，經缺糖、缺氧30min(OGD)后復糖、復氧，模擬“缺血再灌注”模型。腦片分未干預組和纖維結合蛋白10vg2011g30ug干預組。各組分別培養(yǎng)137天。觀察海馬腦片的軸突生長情況，用碘化丙陡熒光排斥法檢測海馬腦片細胞死亡情況，利用免疫組織化學法觀察海馬腦片Bcl2的表達情況。透射電鏡下觀察纖維結合蛋白對海馬腦片超微結構的影響。研究結

6、果顯示:纖維結合蛋白可以明顯改善OGD海馬腦片的軸突再生。OGD后第7天未干預組、1011g20ug30Lg干預組海馬腦片死亡細胞面積百分率(00)分別為37.83土8.2230.25士6.7320.91士5.2513.0013.54統(tǒng)計結果顯示30ug組的死亡細胞所占面積明顯小于20ug組，后者明顯小于10ug組，三者都小于未干預組(P0.05).OGD后第7天未干預組、10ug20ag3011g干預組海馬腦片Bcl2陽性細胞數(shù)分別為