柚皮素增強(qiáng)抗人DR5單抗對人肝癌細(xì)胞系HepG2的凋亡作用.pdf

1、背景：針對人DR5受體的特異性單克隆抗體，是近年來被譽(yù)為最有前景的抗腫瘤藥物。DR5抗體藥物也即將上市，但是其存在的問題也隨之而來，DR5在人體內(nèi)的分布不同，表達(dá)也不同，人們思考怎樣才能最大發(fā)揮其抗癌療效。柚皮素是一種廣泛存在于植物和中藥中的天然黃酮類化合物。有研究顯示發(fā)現(xiàn)其具有多種藥理活性，主要有抗氧化、抗衰老、抗腫瘤、抗動(dòng)脈粥樣硬化、DNA修復(fù)作用等。本研究以HepG2細(xì)胞為研究對象，選用柚皮素和本實(shí)驗(yàn)室制備的mDRA-6單抗合用來

2、探討二者聯(lián)合誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡的協(xié)同作用。
　　 目的：探討柚皮素增強(qiáng)抗人DR5單克隆抗體對人肝癌細(xì)胞系HepG2的凋亡作用及可能機(jī)制。
　　 方法：MTT法檢測柚皮素及抗人DR5單抗對人肝癌細(xì)胞系HepG2的生長抑制作用，Annexin V/PI雙染分析細(xì)胞凋亡，WB蛋白免疫印記檢測Caspase8的表達(dá)，流式細(xì)胞術(shù)檢測HepG2細(xì)胞表面DR5的表達(dá)。
　　 結(jié)果：
　　 1.MTT法檢測結(jié)果表明，10m

3、g/L的mDRA-6作用于HepG2細(xì)胞12h，細(xì)胞增殖抑制率為39％，10mg/L的mDRA-6分別與200μmol/L、400μmol/L、800μmol/L柚皮素共同作用于HepG2細(xì)胞，細(xì)胞增殖抑制率分別增加為58%、79%、85%；
　　 2.Annexin V/PI雙染，流式細(xì)胞術(shù)檢測結(jié)果表明2 mg/L的mDRA-6作用細(xì)胞12h，細(xì)胞凋亡率為16.77%，2 mg/L的mDRA-6和400μmol/L柚皮素共同作

4、用于HepG2細(xì)胞12h，細(xì)胞凋亡率增加為62.66%；
　　 3.免疫印跡技術(shù)檢測顯示，mDRA-6和柚皮素共同作用于HepG2細(xì)胞后，蛋白免疫印記顯示Caspase8的激活片段明顯；
　　 4.流式細(xì)胞術(shù)檢測HepG2細(xì)胞表面DR5的表達(dá)，其基礎(chǔ)表達(dá)率為42%，400μmol/L柚皮素作用于HepG2細(xì)胞12后，HepG2細(xì)胞表面DR5的表達(dá)率增加為73%。
　　 結(jié)論：柚皮素增強(qiáng)抗人DR5單克隆抗體對人肝癌