應(yīng)用單克隆抗體評價捕食性天敵對麥長管蚜的控制作用.pdf

1、采用目測法和網(wǎng)捕法對小麥整個生長季節(jié)內(nèi)昆蟲群落進行了系統(tǒng)調(diào)查，共查得麥田昆蟲10目、62科、113種，其中植食類8目、18科、51種，捕食類5目、11科、23種，寄生類2目、12科、24種，腐食和吸血類1目、12科、15種。采用最優(yōu)分割法分析了麥田昆蟲群落的時間格局并提出了相應(yīng)的防治策略。從營養(yǎng)層和功能團角度對麥田結(jié)構(gòu)和動態(tài)進行了研究。 應(yīng)用雜交瘤技術(shù)，在國內(nèi)外首次以捕食麥長管蚜的多異瓢蟲的消化道粗提物為免疫原，成功地制備出2株

2、高度特異性的麥長管蚜單克隆抗體，分別命名為：EGA-4A9和EGA-2C4。應(yīng)用間接ELISA測定抗體效價的結(jié)果表明，2株單克隆抗體的效價非常高都達到4.09×10<'6>以上。這2株抗體都不與麥田中其它種類的昆蟲及捕食者發(fā)生交叉反應(yīng)，而且也不與捕食其它蚜蟲的多異瓢蟲反應(yīng)，具有高度的特異性。利用鼠源單克隆抗體亞類鑒定試劑盒(ClonotypingTM System/HRP)以雙抗夾心ELISA方法進行檢測，結(jié)果表明EGA-4A9和EGA

3、-2C4分泌的單克隆抗體均為IgG2a亞類。SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳和Western blot印跡分析表明，單克隆抗體EGA-4A9與取食麥長管蚜后的多異瓢蟲粗提物中21kDa和23kDa的多肽結(jié)合，單克隆抗體EGA-2C4與取食麥長管蚜后的多異瓢蟲粗提物中20kDa、22kDa和26kDa，的多肽結(jié)合。從結(jié)果可知，單克隆抗體的結(jié)合蛋白是麥長管蚜在瓢蟲消化道內(nèi)降解的中間產(chǎn)物。 對3種主要的酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)的比較研

4、究表明，間接ELISA的靈敏度高于直接ELISA，分別為0.083μg/ml抗原蛋白和0.33μg/ml抗原蛋白，而雙抗夾心ELISA的靈敏度最差，根本無法使用。在不同的溫度和捕食量下，獵物在捕食者體內(nèi)成單峰型的降解曲線。溫度對獵物的可測定時間有顯著影響，隨著溫度上升獵物的可測定時間不斷縮短，特別是當(dāng)溫度達到30℃時，獵物的降解速率迅速上升，其可測定時間非常短，只有1.17天；而當(dāng)溫度在15℃～20℃之間時，獵物降解緩慢，可測定時間為3

5、.52和3.10天。捕食量對獵物的可測定時間也有顯著的影響，隨著取食量的增加，獵物的可測定時間也隨之延長，在25℃時捕食量為1頭到3頭時，可測定時間從2.80天延長到4.25天。 應(yīng)用麥長管蚜單克隆抗體檢測了內(nèi)蒙古農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)場小麥田的捕食性天敵。結(jié)果表明，麥田的瓢蟲種類較多，對麥長管蚜有較好的控制作用。其中多異瓢蟲和龜紋瓢蟲的種群數(shù)量多，陽性反應(yīng)率較高，控制作用最好。捕食性天敵總的陽性反應(yīng)隨麥長管蚜種群密度的增加而增加相關(guān)關(guān)系顯