慢性腎衰竭大鼠血清二甲基精氨酸與腎功能指標(biāo)及病理損傷的相關(guān)性研究.pdf

1、目的:通過建立慢性腎衰竭模型大鼠，研究慢性腎衰竭大鼠血清不對稱性二甲基精氨酸（asymmetric dimethylarginine，ADMA）、對稱性二甲基精氨酸（symmetric dimethylarginine，SDMA）與傳統(tǒng)評價腎功能指標(biāo)及腎臟病理損傷程度之間的關(guān)系，評價二甲基精氨酸作為生物標(biāo)志物的可行性，判斷其臨床應(yīng)用價值。
　　 方法:84只雄性SD大鼠隨機分為假手術(shù)組(SHAM)和模型組(SNX)各42只。模型

2、組進行5/6腎切除術(shù)建立慢性腎衰竭模型，造模過程分兩期手術(shù)進行，假手術(shù)組同期進行手術(shù)，兩次手術(shù)均僅分離腎周脂肪囊及腎蒂，剝離左、右腎筋膜，不做腎切除。以Ⅱ期手術(shù)結(jié)束作為觀察周期的起點，分別于第4、6、8、10、12、14周末的前一天隨機抽取假手術(shù)組、模型組大鼠各6只，收集24小時尿液測定24h尿蛋白定量(24h urinary protein，UP)、尿量、尿肌酐(urine creatinine，Ucr)，于上述各周末腹主動脈穿刺取血

3、，用于測定血清肌酐(serum creatinine，Scr)、血尿素氮(blood ureanitrogen，BUN)，計算肌酐清除率(creatinine clearance，Ccr)，應(yīng)用高效液相色譜法（high-performance liquid chromatography,HPLC）測定ADMA、SDMA水平。假手術(shù)組摘取左側(cè)腎臟、模型組摘取左側(cè)殘腎，通過PAS、Masson染色觀察不同時期腎臟病理變化，利用腎小球硬化指數(shù)

4、(glomerulosclerosis index，GSI)、腎小管間質(zhì)損傷評分(tubulointerstitial score，TIS)評價病理損傷程度。觀察各指標(biāo)隨時間的變化情況，分析二甲基精氨酸(dimethylarginine，DMA)與傳統(tǒng)腎功能指標(biāo)及病理損傷程度的相關(guān)性。
　　 結(jié)果:
　　 1、一般情況假手術(shù)組大鼠表現(xiàn)機警、反應(yīng)敏捷，行為正常，皮毛致密整齊有光澤，飲食正常，尿道口無血性分泌物，體重逐漸增加

5、。模型組大鼠精神萎靡、活動遲緩，甚至弓背蜷體，皮毛疏松枯槁無光澤，食量減少，部分動物尿道口可見血性分泌物，大便色質(zhì)正常，部分大鼠出現(xiàn)大便量減少，體重增加緩慢。隨著觀察周期延長，與假手術(shù)組相比，模型組大鼠耳、鼻、足背、尾部皮膚略顯蒼白。處死大鼠時剖腹探查可見個別存在小至中等量腹腔積液。
　　 2、各時期常規(guī)生化檢測情況UP:第8、10、12、14周模型組24h尿蛋白定量水平與假手術(shù)組比較明顯升高，具有顯著差異(P＜0.01);Sc

6、r:各時期模型組血肌酐水平與假手術(shù)組比較明顯升高，其中第4周有差異(P＜0.05)，其余各時期差異顯著（P＜0.01）;BUN:各時期模型組血尿素氮水平與假手術(shù)組比較明顯升高，具有顯著差異(P＜0.01);Ccr:第6、8、10、12、14周模型組肌酐清除率水平與假手術(shù)組比較明顯降低，具有顯著差異(P＜0.01)。
　　 3、各時期二甲基精氨酸檢測情況血清ADMA:第4、6、10、12、14周模型組血清ADMA水平較假手術(shù)組升高

7、，具有差異，其中第10周有差異(P＜0.05)，第4、6、12、14周差異顯著(P＜0.01);血清SDMA:第12、14周模型組血清SDMA水平較假手術(shù)組升高，具有差異(P＜0.05)。
　　 4、腎臟病理損傷評價情況GSI:第4、8、10、12、14周模型組GSI與假手術(shù)組比較明顯升高，其中第4周有差異(P＜0.05)，第8、10、12、14周差異顯著(P＜0.01);TIS:第6、8、10、12、14周模型組GSI與假手術(shù)

8、組比較明顯升高，其中第6周有差異(P＜0.05)，第8、10、12、14周差異顯著(P＜0.01)。
　　 5、各項檢測指標(biāo)變化趨勢情況Ⅱ期手術(shù)后4～6周即出現(xiàn)Scr、BUN的升高，Ccr的下降，之后由于殘存腎單位的代償作用，腎功能在6～8周出現(xiàn)一定程度的恢復(fù)，8周后各項指標(biāo)均提示腎臟功能進行性下降。Ⅱ期手術(shù)后4～6周即出現(xiàn)血清ADMA、SDMA的升高，6～8周出現(xiàn)一定程度的恢復(fù)，8周后ADMA、SDMA水平進行性升高。故以第8

9、周作為慢性腎衰竭的觀察起點。
　　 6、相關(guān)性分析:
　　 ①二甲基精氨酸與傳統(tǒng)腎功能指標(biāo)相關(guān)性分析:ADMA與Scr（r=0.587，P＜0.01）、BUN(r=0.617，P＜0.01)呈顯著正相關(guān)，與Ccr(r=-0.479，P＜0.01)呈顯著負(fù)相關(guān);SDMA與Scr（r=0.420，P＜0.01）、BUN(r=0.442，P＜0.01)呈顯著正相關(guān)，與Ccr（r=-0.427，P＜0.01）呈顯著負(fù)相關(guān);

10、>　　 ②二甲基精氨酸與病理損傷指標(biāo)相關(guān)性分析:血清ADMA與GSI(r=0.694，P＜0.01)呈顯著正相關(guān)，與TIS（r=0.650，P＜0.01）呈顯著正相關(guān);血清SDMA與GSI(r=0.495，P＜0.01)呈顯著正相關(guān)，與TIS（r=0.485，P＜0.01）呈顯著正相關(guān)。
　　 結(jié)論:
　　 1、本研究采用5/6腎切除法構(gòu)建慢性腎衰竭的大鼠模型，該模型具有較強的臨床相似性、可靠性;
　　 2、血