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1、目的:運(yùn)用溶劑法和多種色譜方法對(duì)白花丹參的化學(xué)成分進(jìn)行提取分離和鑒定,探討其化學(xué)成分對(duì)血管內(nèi)皮細(xì)胞的保護(hù)作用,為白花丹參治療血栓閉塞性脈管炎提供科學(xué)依據(jù)。
方法:利用大孔樹(shù)脂、硅膠和凝膠柱色譜等現(xiàn)代分離手段,對(duì)白花丹參脂溶性和水溶性化學(xué)成分進(jìn)行分離和純化,采用IR、MS、1H-NMR、13C-NMR等譜學(xué)方法對(duì)所得化合物結(jié)構(gòu)進(jìn)行鑒定。將體外培養(yǎng)的人臍靜脈血管內(nèi)皮細(xì)胞分為正常組、LPS凋亡損傷誘導(dǎo)組、白花丹參保護(hù)組,吖啶橙染色,
2、共聚焦顯微鏡觀測(cè)凋亡細(xì)胞核片段化狀況;PI染核,流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞周期分布。生化試劑盒檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)脂質(zhì)過(guò)氧化物(MDA)含量,超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽過(guò)氧化物酶(GSH-PX)活性。
結(jié)果:從白花丹參氯仿提取物中分離得到11個(gè)化合物,各種譜學(xué)技術(shù)鑒定了7個(gè)化合物,包括丹參酮ⅡA、隱丹參酮、丹參酮Ⅰ、二氫丹參酮Ⅰ、β-谷甾醇、丹參新醌乙、丹參素。白花丹參脂溶性部位及成分對(duì)LPS誘導(dǎo)的血管內(nèi)皮細(xì)胞凋亡沒(méi)有保護(hù)作用,水溶性部
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