3種卷柏屬藥用植物抗腫瘤作用的實驗研究.pdf

1、目的：探索卷柏屬3種藥用植物中黃酮類化合物的抗腫瘤作用，并闡明其作用機理。 方法：體外培養(yǎng)肺癌A549，肝癌Bel-7402和結腸癌HT-29三種人類癌細胞，將卷柏屬藥用植物的不同提取物作用于癌細胞。(1)通過倒置顯微鏡對各藥物組作用后細胞的形態(tài)改變進行觀察；(2)應用MTT法計算出各種藥物不同濃度、不同作用時間對3種癌細胞生長的抑制率，分析其對細胞增殖的影響；(3)用流式細胞術(FCM)檢測細胞凋亡。(4)采用逆轉錄聚合酶鏈反

2、應(Rcverse transcriptionpolymerase chain reation，RT-PCR)法檢測COX-2的mRNA水平，用電泳凝膠成像自動分析系統(tǒng)檢測各擴增帶的產(chǎn)物含量，用下列公式表示：灰度值=COX-2mRNA密度/β-actin mRNA密度。 結果：卷柏屬藥用植物7種活性成分和活性部位作用于腫瘤細胞后，光鏡下可見癌細胞出現(xiàn)凋亡的形態(tài)改變。細葉卷柏中5種(組)雙黃酮類化合物對3種癌細胞系有顯著抑制作用，

3、并能誘導這些腫瘤細胞的凋亡，其抑制作用與時間、濃度呈正相關。翠云草總黃酮和江南卷柏總黃酮可以在mRNA水平上抑制COX-2的表達。 結論：發(fā)現(xiàn)了細葉卷柏中5種雙黃酮類化合物可抑制3種腫瘤細胞的生長，流式細胞術檢測進一步證實誘導細胞凋亡是其抗癌機制之一。COX-2在各腫瘤組織中都有較高的表達，翠云草總黃酮和江南卷柏總黃酮能在mRNA水平上抑制COX-2，進而抑制COX-2蛋白質表達，降低PGE2產(chǎn)量，可能是這兩種藥用植物抗腫瘤作用