海南暗羅屬植物與藜蘆抗腫瘤作用研究.pdf

1、第一章海南暗羅屬植物化學(xué)成分和體外抗腫瘤活性
　　目的：以腫瘤細(xì)胞抑制率作為評(píng)價(jià)指標(biāo)，指導(dǎo)五種海南暗羅屬植物系統(tǒng)的分離，力求在海南暗羅屬植物中尋找到新的對(duì)腫瘤細(xì)胞具有高度選擇性的活性成分或部位。
　　方法：本研究應(yīng)用天然藥物有機(jī)化學(xué)相關(guān)方法和細(xì)胞生物學(xué)相關(guān)方法對(duì)五種海南暗羅屬植物進(jìn)行抗腫瘤活性物質(zhì)基礎(chǔ)研究。
　　1、濃縮提取液所得浸膏以系統(tǒng)溶劑分離法進(jìn)行部位分離，利用大孔吸附樹脂法、硅膠柱色譜法、葡聚糖凝膠柱色譜法和重

2、結(jié)晶法對(duì)石油醚、氯仿、乙酸乙酯部位進(jìn)行分離純化，運(yùn)用NMR、UV、IR、MS等光譜波譜方法結(jié)合對(duì)各單體化合物文獻(xiàn)研究進(jìn)行結(jié)構(gòu)鑒定。
　　2、用細(xì)胞生物學(xué)中MTT體外實(shí)驗(yàn)的方法，選取四種臨床常見人腫瘤細(xì)胞株人肺腺癌細(xì)胞（SPC-A-1）、人肝癌細(xì)胞（BEL-7402）、人胃癌細(xì)胞（SGC-7901）和人白血病細(xì)胞（K562），對(duì)樣品進(jìn)行抗腫瘤活性測(cè)試。
　　結(jié)果：
　　1、本研究從海南暗羅根和香花暗羅莖中分離得到24個(gè)化

3、合物，其中化合物9、化合物12和化合物16為新化合物，分別命名為polyalimide A、rumphiin、polyalthurea，其他21個(gè)化合物均為已知化合物，首次從該植物中分離得到。
　　2、對(duì)五種海南暗羅屬植物的根、莖、葉不同藥物部位進(jìn)行抗腫瘤活性篩選實(shí)驗(yàn)，結(jié)果顯示，海南暗羅根、香花暗羅莖、香花暗羅葉、香花暗羅根四個(gè)部位對(duì)四種腫瘤細(xì)胞均有較強(qiáng)的生長(zhǎng)抑制活性，半數(shù)抑制濃度均小于100μg/mL。提示下一步的分離工作可以圍

4、繞這四個(gè)藥物部位開展。
　　3、對(duì)海南暗羅根和香花暗羅莖乙酸乙酯部位、氯仿部位、石油醚部位的體外抗腫瘤活性實(shí)驗(yàn)結(jié)果可以看出，其對(duì)腫瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)抑制作用不局限在某一個(gè)特定的部位，提示后期對(duì)化合物的分離應(yīng)對(duì)三個(gè)部位分別開展。
　　4、本課題從海南暗羅根氯仿部位中分離出的新化合物9（polyalimide A），對(duì)人肝癌細(xì)胞（BEL-7402）未檢測(cè)出活性，對(duì)人肺腺癌細(xì)胞（SPC-A-1）、人胃癌細(xì)胞（SGC-7901）和人白血病

5、細(xì)胞（K562）顯示出一定的生長(zhǎng)抑制活性，半數(shù)抑制濃度（IC50）分別為94.5μg/mL、96.76μg/mL和62.73μg/mL；本課題從香花暗羅莖中分離出2個(gè)新化合物，從氯仿部位分離得到的新化合物11（rumphiin）對(duì)人肺腺癌細(xì)胞（SPC-A-1）和人白血病細(xì)胞（K562）顯示出一定的生長(zhǎng)抑制活性，半數(shù)抑制濃度（IC50）分別為187.6μg/mL、63.2μg/mL。從石油醚部位分離的新化合物15（polyalthurea

6、）對(duì)四種細(xì)胞均無(wú)生長(zhǎng)抑制活性。
　　5、本課題對(duì)分離得到的21個(gè)已知化合物也進(jìn)行了抗腫瘤活性實(shí)驗(yàn)。結(jié)果顯示，從海南暗羅石油醚部位分離出的化合物5（Kolavenic acid）、化合物6（2-oxo-kolavenic acid）對(duì)四種腫瘤細(xì)胞體外生長(zhǎng)抑制活性較強(qiáng)，半數(shù)抑制濃度（IC50）均小于50μg/mL；從香花暗羅乙酸乙酯部位分離出的化合物15（oxostephanine）對(duì)人肺腺癌細(xì)胞（SPC-A-1）、人肝癌細(xì)胞（BEL

7、-7402）顯示出極強(qiáng)的生長(zhǎng)抑制活性，半數(shù)抑制濃度（IC50）分別為1.47μg/mL、1.73μg/mL。
　　結(jié)論：本課題從單體化合物水平闡明了海南暗羅和香花暗羅的抗腫瘤活性的物質(zhì)基礎(chǔ)，對(duì)這些化合物的體內(nèi)抗腫瘤作用和作用機(jī)制還有待進(jìn)一步的深入研究。同時(shí)，本課題從海南暗羅和香花暗羅中分離得到了3個(gè)新化合物，提示暗羅屬植物的化學(xué)成分研究有很大的空間。
　　第二章藜蘆提取物體內(nèi)抗腫瘤活性實(shí)驗(yàn)
　　目的：研究藜蘆提取物體內(nèi)

8、對(duì)人胰腺癌SW1990細(xì)胞的生長(zhǎng)抑制活性。
　　方法：建立人胰腺癌裸鼠移植瘤模型，并隨機(jī)分為對(duì)照組、5-FU組、藜蘆提取物高、中、低劑量組。以瘤重抑瘤率和相對(duì)腫瘤體積抑瘤率為評(píng)價(jià)指標(biāo)觀察藜蘆提取物對(duì)胰腺癌腫瘤增殖的抑制作用。
　　結(jié)果：和對(duì)照組相比，藜蘆提取物在3.75、7.5、15mg/kg劑量下，連續(xù)灌胃給藥14天的腫瘤增殖抑制率為14.79％、32.02%、32.96%；5-FU在15mg/kg劑量時(shí)，連續(xù)腹腔給藥7次