RP-HPLC對不同環(huán)糊精衍生物與西洛他唑包合性研究.pdf

1、西洛他唑(Cilostazol)屬于抗血小板聚集藥，主要通過抑制血小板及血管平滑肌內(nèi)磷酸二酯酶活性，從而增加血小板及平滑肌內(nèi) cAMP濃度、發(fā)揮抗血小板作用及血管擴(kuò)張作用。西洛他唑在臨床上具有重要的用途，可用于治療由動(dòng)脈粥樣硬化、大動(dòng)脈炎、血栓閉塞性脈管炎、糖尿病所致的慢性動(dòng)脈閉塞癥，改善肢體缺血所引起的慢性潰瘍、疼痛、發(fā)冷及間歇跛行等缺血性癥狀[1-3]。但是西洛他唑味苦，微溶于水，生物利用度低，其使用范圍受到了一定的局限，而環(huán)糊精及

2、其衍生物都具有特殊的環(huán)狀中空圓筒形結(jié)構(gòu)，具有疏水的內(nèi)腔和親水的外表，對藥物分子具有包合作用，從而可以改善藥物的理化特性，如改善藥物的溶解度，掩蓋藥物的不良?xì)馕?，提高藥物的穩(wěn)定性、溶出度和生物利用度等[4-8]。為了提高西洛他唑溶解度和生物利用度，掩蓋其不良味道，本課題以西洛他唑?yàn)檠芯繉ο?，首次采用RP-HPLC法在不同溫度下對不同取代基和不同取代度環(huán)糊精衍生物與西洛他唑的包合作用性質(zhì)進(jìn)行了研究，測定了六種不同環(huán)糊精衍生物與西洛他唑的包合

3、平衡常數(shù)，確定了主客分子包合摩爾比，并進(jìn)一步研究和討論包合過程的熱力學(xué)變化。同時(shí)制備了六種不同環(huán)糊精與西洛他唑的超分子包合物，并對其進(jìn)行了表征和評價(jià)。本研究為不同環(huán)糊精衍生物與西洛他唑的超分子包合物的工業(yè)化生產(chǎn)提供了一定的理論和實(shí)踐基礎(chǔ)。
　　本文研究內(nèi)容和實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下：
　　（1）當(dāng)色譜柱溫度分別設(shè)為25℃、37℃、45℃時(shí)，采用RP-HPLC對不同取代基的環(huán)糊精衍生物與西洛他唑的包合作用性質(zhì)進(jìn)行研究。主要考察主客分子包合

4、摩爾比，測定β-CD、HP-β-CD、DM-β-CD、SBE1-β-CD四種不同環(huán)糊精與西洛他唑的包合平衡常數(shù)以及包合過程中的熱力學(xué)參數(shù)（ΔG、ΔH、ΔS）的變化。結(jié)果表明，當(dāng)不同取代基的環(huán)糊精衍生物與西洛他唑在溫度分別為25℃、37℃、45℃時(shí)發(fā)生包合作用，其主客分子包合摩爾比均為1:1，包合平衡常數(shù)大小依次為KSBE1-β-CD﹥KDM-β-CD﹥KHP-β-CD﹥Kβ-CD。西洛他唑與四種不同環(huán)糊精的包合過程為放熱反應(yīng)(ΔH<0)

5、，故隨著溫度的升高，包合過程將向著解離的方向進(jìn)行。同時(shí)，包合過程為熵值減小的過程。包合過程的吉布斯自由能（ΔG）在溫度為25℃、37℃、45℃時(shí)均為負(fù)值，表明該包合過程在上述不同溫度下可自發(fā)進(jìn)行。
　?。?）當(dāng)色譜柱溫度分別設(shè)為25℃、37℃、45℃時(shí)，采用RP-HPLC對不同取代度的環(huán)糊精衍生物與西洛他唑的包合作用性質(zhì)進(jìn)行研究。主要考察主客分子包合摩爾比，測定SBE1-β-CD、SBE4-β-CD、SBE7-β-CD三種不同取代

6、度的SBE-β-CD與西洛他唑的包合平衡常數(shù)以及包合過程中的熱力學(xué)參數(shù)（ΔG、ΔH、ΔS）的變化。結(jié)果表明，當(dāng)取代度為1、4、7的SBE-β-CD與西洛他唑在溫度分別為25℃、37℃、45℃時(shí)發(fā)生包合作用，其主客分子包合摩爾比均為1:1，包合平衡常數(shù)大小依次為KSBE7-β-CD﹥KSBE4-β-CD﹥KSBE1-β-CD。西洛他唑與三種不同取代度的SBE-β-CD的包合過程為放熱反應(yīng)(ΔH<0)，適當(dāng)?shù)亟档蜏囟扔欣诎衔锏男纬膳c穩(wěn)定

7、。同時(shí)，包合過程為熵值減小的過程。包合過程的吉布斯自由能（ΔG）在為25℃、37℃、45℃時(shí)均為負(fù)值，表明該包合過程在上述不同溫度下可自發(fā)進(jìn)行。
　　（3）進(jìn)行了 RP-HPLC對不同 CD衍生物包合物含量測定的方法學(xué)研究，建立了RP-HPLC測定不同CD衍生物/西洛他唑超分子包合物中西洛他唑含量的分析方法。采用Agilent Extend C18色譜柱(4.6mm×150mm，5μm)，流動(dòng)相為乙腈-水(40∶60)，流速1.1

8、 mL/min，檢測波長254nm。西洛他唑在5.2～208μg/mL濃度范圍內(nèi)線性關(guān)系良好(r=0.9999)；平均加樣回收率分別為99.41％、100.07％、99.63％、99.96％、99.40％、99.71％；RSD分別為0.41％、0.65％、0.66％、0.86％、0.27％、0.83％。結(jié)果表明，該方法準(zhǔn)確可靠、專屬性強(qiáng)、重復(fù)性好，為不同 CD衍生物/西洛他唑超分子包合物的質(zhì)量控制提供了參考。
　?。?）采用超聲波

9、法制備了六種不同環(huán)糊精與西洛他唑的超分子包合物，采用X-衍射法和紅外分光光度法對其進(jìn)行了表征,采用RP-HPLC對其包封率和含藥量進(jìn)行了評價(jià)。結(jié)果表明，六種不同環(huán)糊精均與西洛他唑均形成了超分子包合物，不同環(huán)糊精包合物中藥物含量高低依次為: Cilostazol-β-CD＞Cilostazol-DM-β-CD＞Cilostazol-SBE1-β-CD＞Cilostazol-HP-β-CD＞Cilostazol-SBE4-β-CD＞Cilo