小鼠精原干細(xì)胞分離、純化和移植以及藍(lán)狐卵母細(xì)胞電脈沖刺激的研究.pdf

1、本研究論文包括兩部分內(nèi)容，一部分是關(guān)于小鼠精原干細(xì)胞的研究，另一部分是關(guān)于藍(lán)狐卵母細(xì)胞體外成熟和電脈沖刺激的研究。 小鼠精原干細(xì)胞的研究包括4個(gè)實(shí)驗(yàn)：實(shí)驗(yàn)一、小鼠胚胎成纖維細(xì)胞飼養(yǎng)層的制作，為本實(shí)驗(yàn)室正在開(kāi)展的胚胎干細(xì)胞和精原干細(xì)胞研究提供了飼養(yǎng)層細(xì)胞，建立了小鼠胚胎成纖維細(xì)胞系；實(shí)驗(yàn)二、小鼠精原干細(xì)胞的分離純化，通過(guò)兩步酶消化法分離6～8日齡小鼠睪丸細(xì)胞，Percoll不連續(xù)密度梯度離心，獲得了較多數(shù)量的活細(xì)胞，可用于進(jìn)一步培

2、養(yǎng)和移植；實(shí)驗(yàn)三、精原干細(xì)胞移植模型小鼠的制作，通過(guò)對(duì)4周齡昆明白小鼠腹腔內(nèi)單次注射白消安(30mg/kg和40mg/kg體重)，30天后獲得了可用作精原干細(xì)胞移植的受體模型小鼠；實(shí)驗(yàn)四、小鼠精原干細(xì)胞移植，成功通過(guò)睪丸網(wǎng)注射精原干細(xì)胞，建立了小鼠精原干細(xì)胞移植體系，為轉(zhuǎn)基因動(dòng)物生產(chǎn)開(kāi)辟了新途徑。 藍(lán)狐卵母細(xì)胞體外成熟培養(yǎng)部分共一個(gè)實(shí)驗(yàn)：藍(lán)狐卵母細(xì)胞體外成熟和電脈沖刺激的研究，采集乏情期藍(lán)狐卵巢，切割法獲得卵母細(xì)胞，體外成熟不同