自噬基因Beclin-1和微管相關(guān)蛋白LC3在大鼠阿霉素心肌病中的表達及其意義的實驗研究.pdf

1、目的：探討自噬基因Beclin-1及微管相關(guān)蛋白LC3在大鼠阿霉素(Adriamycin，ADR)心肌病中的表達及其意義，初步證實自體吞噬(Autophagy)參與了大鼠阿霉素心肌病的發(fā)病，并探討其機制，為臨床阿霉素心肌病的防治提供理論依據(jù)。 方法：雄性(Sprague-Dawley) SD大鼠45只，體重在180～200克之間，隨機分為3組，阿霉素(ADR)組(N=15)，阿霉素(ADR)+3-甲基腺嘌呤(3-Methylad

2、enine，3-MA)組(N=15)，對照組(N=15)。阿霉素(ADR)組：實驗的第二天起腹腔注射阿霉素4mg/kg，每周一次，共6周，累計劑量24mg/kg；阿霉素(ADR)+3-甲基腺嘌呤(3-MA)組：實驗的第二天起腹腔注射同等劑量的阿霉素，在注射前半小時腹腔注射自噬抑制劑3-甲基腺嘌呤(3-MA)500nm01(5ul)；對照組：腹腔注射等量的生理鹽水。實驗第六周末大鼠稱重并心臟彩超測量左室收縮功能(射血分數(shù)EF及縮短分數(shù)FS

3、)，心臟取血分光光度法檢測血漿中丙二醛( malondialdehyde，MDA)及全血中還原型谷胱甘肽(reduced glutathione，GSH)含量，取心臟并稱重后計算心臟重量指數(shù)(heart weight index，HWI)，取左心室心肌標本，HE(hematoxylin and eosin)染色觀察心肌病理改變，電鏡觀察自噬體形態(tài)及數(shù)量，免疫印跡法(west-blotting)檢測心肌組織中自噬基因Beclin-1的含量

4、，免疫組化S-P法測定心肌細胞微管相關(guān)蛋白(Microtubule-associate Protein1Light Chain3，LC3)含量。所有數(shù)據(jù)均采用SPSS11.5統(tǒng)計軟件進行統(tǒng)計分析。 結(jié)果：1、ADR組大鼠左室收縮功能較對照組下降，P<0.05，具統(tǒng)計學(xué)意義；ADR組大鼠心臟重量指數(shù)(HWI)較對照組增高，P<0.05，具統(tǒng)計學(xué)意義； 2、ADR組血漿MDA含量較對照組增高，P<0.05，具統(tǒng)計學(xué)意義，AD

5、R組全血GSH含量較對照組減低，P<0.05，具統(tǒng)計學(xué)意義； 3、免疫印跡法顯示：ADR組心肌組織中Beclin-1水平較對照組及ADR+3-MA組增高，P<0.05，具統(tǒng)計學(xué)意義； 4、免疫組織化學(xué)染色顯示：ADR組心肌組織中LC3含量較對照組及ADR+3-MA組增高，P<0.05，具統(tǒng)計學(xué)意義； 5、直線相關(guān)分析：自噬基因Beclin-1水平與微管相關(guān)蛋白LC3含量呈顯著正相關(guān)。 結(jié)論：1、阿霉素可引