胰腺癌中自噬相關(guān)蛋白Beclin1、LC3和P62的表達(dá)及臨床意義.pdf

1、背景與目的：
　　自噬（autophagy）是近年來研究熱點(diǎn)，指細(xì)胞通過各種途徑在自噬溶酶體內(nèi)自我消化、分解受損傷的細(xì)胞器、蛋白質(zhì)等，是一種亞細(xì)胞水平的“自我消化”[1]?；A(chǔ)水平的自噬對(duì)于細(xì)胞生長發(fā)育、發(fā)揮其生物學(xué)功能是必要的，通過自噬細(xì)胞可以維持自我穩(wěn)態(tài)，可以更好的適應(yīng)各種應(yīng)激，達(dá)到自我更新等；且當(dāng)細(xì)胞受到較大損傷不能通過自身調(diào)節(jié)恢復(fù)時(shí)，可以啟動(dòng)自噬性死亡，因此又被稱為Ⅱ型程序性死亡[2]。在眾多的人類腫瘤中，均可以發(fā)現(xiàn)自噬水

2、平的變化。細(xì)胞自噬是一個(gè)復(fù)雜的過程，多條信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑參與自噬水平的調(diào)節(jié)，并且細(xì)胞自噬可以在多種條件下被誘導(dǎo)，生長因子、細(xì)胞內(nèi)氨基酸水平、葡萄糖水平、DNA損傷、氧自由基等均可誘導(dǎo)細(xì)胞自噬水平的變化[3]。Beclin1、LC3和P62是參與自噬過程的三個(gè)主要蛋白，Beclin1在自噬的啟動(dòng)階段發(fā)揮了重要作用，Beclin1與 P13K(hVPS34)、Atg14形成三聚體，并不斷募集自噬相關(guān)蛋白，介導(dǎo)自噬起始[4]；在Atg4作用下，L

3、C3前體被加工成可溶性LC3-Ⅰ，后者在Atg7(E1樣酶)和Atg3(E2樣酶)作用下與磷脂酰乙醇胺(PE)連接成為脂溶性的LC3-Ⅱ-PE，參與自噬溶酶體膜的延伸，直到自噬溶酶體形成[5-6]；定位于細(xì)胞質(zhì)中的P62與經(jīng)泛素化的蛋白結(jié)合，P62蛋白再與 LC3-II蛋白結(jié)合形成復(fù)合物，并最終會(huì)在溶酶體內(nèi)降解，在自噬的過程中，P62會(huì)不斷被消耗[6-7]，這三個(gè)蛋白是檢測(cè)自噬水平的關(guān)鍵指標(biāo)。
　　胰腺癌是一種高度侵襲性的惡性腫瘤

4、，發(fā)病隱匿，大部分患者診斷時(shí)已屬晚期，5年生存率僅有1-4％，預(yù)后差[8-9]，深入研究胰腺癌的發(fā)病機(jī)制對(duì)提高胰腺癌的早期診斷及改善患者預(yù)后都非常重要，然而目前關(guān)于自噬相關(guān)蛋白在胰腺癌的表達(dá)及其相關(guān)性的研究卻相對(duì)較少。
　　目的：
　　通過檢測(cè)胰腺癌、癌旁正常組織中自噬相關(guān)蛋白Beclin1、LC3和P62的表達(dá)，探討在胰腺癌中自噬活性的改變及臨床意義。
　　方法：
　　收集鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院2011年6月至2

5、013年6月經(jīng)外科手術(shù)切除的胰腺癌組織標(biāo)本64例，并收集對(duì)應(yīng)癌旁正常組織標(biāo)本64例作為對(duì)照，應(yīng)用免疫組織化學(xué)法檢測(cè)64例胰腺癌組織及相應(yīng)癌旁正常組織中自噬相關(guān)蛋白Beclin1、LC3和P62的表達(dá)情況；分析自噬蛋白表達(dá)水平與胰腺癌臨床病理特征的關(guān)系。采用SPSS17.0進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，不同病理特征間蛋白陽性率的比較采用χ2檢驗(yàn)，不同蛋白水平的相關(guān)性采用Spearman相關(guān)分析，檢驗(yàn)水準(zhǔn)α=0.05，P<0.05為差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

6、r>　　結(jié)果：
　　表達(dá)陽性率為44.4%(12/27)、III~IV期表達(dá)陽性率為16.2%(6/37)，LC3在TNM I~II期表達(dá)陽性率為48.1%(13/27)，III~IV期表達(dá)陽性率為24.3%(9/37)，各自差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P均<0.05)。
　　3. Spearman相關(guān)分析顯示，Beclin1與LC3在胰腺癌組織中的表達(dá)水平呈正相關(guān)(r=0.572，P<0.05)。P62蛋白的表達(dá)與Beclin1

7、、LC3蛋白的表達(dá)均無明顯相關(guān)相關(guān)(r值分別為0.04、0.11，P值均>0.05)。
　　結(jié)論：
　　1.自噬相關(guān)蛋白Beclin1、LC3在胰腺癌局部組織中表達(dá)下調(diào)，P62蛋白在胰腺癌局部組織中表達(dá)水平上調(diào)，提示胰腺癌局部自噬水平降低。
　　2. Beclin1、LC3蛋白的表達(dá)水平與胰腺癌分化程度、TNM分期相關(guān)，分化程度越低、TNM分期越晚，Beclin1、LC3的表達(dá)水平越低。P62蛋白表達(dá)水平僅與胰腺癌TN