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文檔簡介
1、目的:研究線粒體ATP敏感性鉀通道抑制劑(5-羥基癸酸鹽簡稱5-HD)對大鼠低氧性肺動脈高壓(HPH)及其肺血管結(jié)構(gòu)重建的影響。
方法:將SPF級雄性Splague-Dawley(SD)大鼠24只,體重(250~300)g,隨機分為正常組(N組),慢性缺氧+PBS組(CH組),慢性缺氧組(CH組)+5-HD組(5mg/kg),每組8只。慢性缺氧組置于常壓低氧艙內(nèi),艙內(nèi)充入氮氣稀釋保持低氧,使氧濃度保持在10.0%±0.5%
2、,CO2和水蒸氣分別由鈉石灰和無水氯化鈣吸收,CO2濃度維持在2.0%~3.0%。每天8 h,每周6 d,連續(xù)四周。大鼠在慢性低氧一周后,每天皮下注射5-HD一次,時間為3周,對照組置于同一實驗室內(nèi)。四周后右心導(dǎo)管法測肺動脈平均壓(mPAP),頸總動脈插管測頸動脈平均壓(mCAP),稱取右室(RV)和左室+室間隔(LV+S)的重量,以RV/(Lv+S)重量比來反映右心室重量的變化。光鏡下結(jié)合圖象分析軟件測定相對肺動脈中膜厚度度(PAMT
3、),透射電鏡觀察肺細小動脈超微結(jié)構(gòu)的變化,免疫組化法測定肺小動脈管壁a-actin表達量,反映肺血管重建情況。酶標儀法檢測肺組織勻漿Caspase9、Caspase3酶活性反映肺血管凋亡情況。
結(jié)果:
1、CH組mPAP、RV/(LV+S)、PAMT顯著高于正常N組(P<0.05);CH+5-HD干預(yù)組mPAP、RV/(LV+S)、PAMT顯著低于CH組,但高于N組P<0.05);組間mCAP比較無顯著性差異
4、(P>0.05)。
2、CH組肺小動脈管壁a-actin含量顯著高于正常組(P<0.05);CH+5-HD干預(yù)組大鼠肺細小動脈a-actin含量顯著低于CH組(P<0.05)。
3、透射電鏡顯示CH組肺小動脈內(nèi)皮細胞腫脹,豎狀突起,凸向管腔,與基底膜相連處有大量空泡,內(nèi)彈力板高度扭曲,粗細不均勻,部分區(qū)域結(jié)構(gòu)不清甚至斷裂,膠原纖維增多,中膜平滑肌細胞增生、腫脹,膠原纖維增生。CH+5-HD組肺小動脈內(nèi)皮細胞基
5、本恢復(fù)正常,中膜平滑肌層變薄,粗細均勻,膠原纖維明顯減少。
4、光鏡下大鼠肺血管形態(tài)學影響的觀察:HE染色切片顯示正常組大鼠肺小動脈管壁菲薄,厚薄一致,低氧組大鼠肺小動脈平滑肌細胞增生肥大,管壁普遍增厚,管腔明顯狹窄,5-HD干預(yù)組大鼠肺小動脈管壁增厚程度及血管腔狹窄程度顯著減輕。維多利亞藍彈力膜染色觀察各組大鼠腺泡肺動脈3種類型血管構(gòu)成比的改變:正常組呼吸性細支氣管水平環(huán)肌型動脈明顯減少,以無肌型動脈為主,而低氧組肺小動
6、脈管壁較厚,內(nèi)外兩層彈力纖維膜之間距離增寬,IAPA中的CMA、PAM構(gòu)成比升高,NMA顯著減低,而5-HD干預(yù)組構(gòu)成比較低氧組明顯降低(P<0.05)。
5、CH組大鼠肺組織勻漿Caspase9酶活性顯著低于N組(P<0.05);CH+5-HD)組大鼠肺組織勻漿Caspase9酶活性顯著高于CH組(P<0.05)。CH組大鼠肺組織勻漿Caspase3酶活性顯著低于N組(P<0.05);CH+5-HD組大鼠肺組織勻漿Cas
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