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文檔簡介
1、目的:研究中藥禹州漏蘆(RadixEchinopsis)對人多發(fā)性骨髓瘤細胞株U266的誘導凋亡作用并初步探究其誘導凋亡的機制。為多發(fā)性骨髓瘤的治療尋找一種有效低毒的中草藥抗腫瘤制劑,有助于新藥的開發(fā)和應用。
方法:采用血清藥理學的方法模擬禹州漏蘆在體內(nèi)發(fā)生的藥物效應;首先將購得的禹州漏蘆原藥材利用醇提法制備不同濃度禹州漏蘆粗提液(4g/ml,2g/ml,1g/ml),后分別灌胃大鼠,一定時間后腹主動脈采血,無菌分離血清,并將
2、不同濃度禹州漏蘆含藥血清作用于人多發(fā)性骨髓瘤U266細胞株;Hoechst33258染色后激光掃描共聚焦顯微鏡觀察不同濃度禹州漏蘆含藥血清作用后U266細胞凋亡形態(tài);AnnexinV/PI雙染后采用流式細胞技術檢測不同濃度禹州漏蘆含藥血清作用后的細胞凋亡率;HDAC活性/抑制直接分析試劑盒(比色法)檢測不同濃度禹州漏蘆含藥血清作用后骨髓瘤細胞內(nèi)組蛋白去乙?;福╤istonedecetylase,HDAC)的活性及其抑制率。
3、結果:
1將不同濃度禹州漏蘆含藥血清作用人多發(fā)性骨髓瘤U266細胞48h后在激光掃描共聚焦顯微鏡下可觀察到處于不同凋亡進程中的細胞,且中濃度組和高濃度組可見凋亡小體。
2流式細胞儀檢測禹州漏蘆含藥血清誘導的細胞凋亡作用具有濃度、時間依賴性,且高濃度禹州漏蘆含藥血清可顯著誘導多發(fā)性骨髓瘤細胞凋亡(P<0.001)。
3HDAC活性/抑制試驗結果顯示,不同濃度禹州漏蘆含藥血清作用于人骨髓瘤U266細胞后,可檢測
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