PRRSV CH-1R株黏膜免疫效果的測定及其ORF5的遺傳變異分析.pdf

1、本研究選用6周齡大的長白系雜交仔豬,用于PRRSV CH-1R致弱毒株黏膜免疫效果的測定.通過臨床癥狀、病理學變化和抗體分布的檢測證實了PRRSV CH-1R致弱毒株經鼻腔免疫的安全性和黏膜免疫反應.而且我們還檢測了經鼻腔免疫PRRSV CH-1R致弱毒株的仔豬的IgA和IgG抗體水平、IFN-γ和TGF β-β1細胞因子水平等方面.通過研究表明,弱毒免疫組的某些組織器官在臨床剖檢和組織病理學上有一定的變化,但與強毒組相比程度較輕;間接

2、免疫熒光試驗結果顯示,免疫組明顯比對照組和強毒組的熒光反應要強;鼻灌洗液和肺灌洗液中,免疫組sIgA的水平在免疫后隨時間的延長,呈現(xiàn)上升趨勢,攻強毒后,sIgA水平明顯升高;免疫組血清中,TGF-β1細胞因子水平隨免疫時間的延長,在免疫第14天前是呈上升趨勢的,從免疫14天后呈下降趨勢,攻強毒后,TGF-β1細胞因子水平在攻毒后前7天時呈快速上升,并且上升速度比免疫前期快,但在攻毒14天后已經開始下降;IFN-γ細胞因子水平隨免疫時間的

3、延長,變化與對照組基本一致,IgG抗體水平隨免疫時間的延長,從免疫14天后呈上升趨勢,在免疫35天后達到平臺期,攻強毒后,IgG抗體水平明顯升高,并且上升速度比免疫前期快.綜合所有的檢測結果我們認為,經鼻黏膜免疫接種PRRSV CH-1R株弱毒疫苗,可以刺激機體產生較高的黏膜免疫反應和體液免疫反應,有效的保護易感動物. 在進行動物免疫試驗的同時,本研究選取了10個不同代次的CH-1a株和CH-1R株病毒利用RT-PCR擴增ORF

4、5基因,并與其它8株序列進行序列比對,分析CH-1R株致弱過程中的遺傳變異情況.ORF5基因的變異分析顯示,該致弱毒株與CH-1a株以及其它8株參考毒株存在著差異,ORF5基因同源性在88.7﹪～99.8﹪.而且系統(tǒng)進化樹研究表明,該弱毒株仍屬于CH-1a亞群.通過軟件對其所編碼的GP5蛋白的氨基酸序列比較,我們發(fā)現(xiàn)相對于CH-1a株,CH-1a株S70、CH-1R株S85、S100、S115、S120、S125和S130代病毒在第38