PHA生物材料支架對臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞向成骨分化的影響.pdf

1、大量的實(shí)驗(yàn)證明：聚羥基脂肪酸酯(PHAs，polyhydroxyalkanoates)作為組織工程的支架材料具有優(yōu)越的應(yīng)用前景，間充質(zhì)干細(xì)胞（MSCs, Mesenchymal stem cells)在治療各種組織缺損和器官修復(fù)方面具有來源廣、分離易、無免疫性、增殖分裂能力強(qiáng)，可以分化為神經(jīng)細(xì)胞、脂肪細(xì)胞、成骨細(xì)胞等多種分化能力。本論文將由人臍帶沃頓膠質(zhì)組織（Wharton’s jelly）分離所得的臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞（UC-MSCs,

2、umbilical cord mesenchymal stem cells）植入到PHA生物材料家族的PHBHHx、P3HB4HB和PHBVHHx支架內(nèi)，將UC-MSCs誘導(dǎo)分化為成骨細(xì)胞，通過CCK8方法檢測支架內(nèi)細(xì)胞的增殖能力，采用對生物材料物理性能的檢測確定各種材料的機(jī)械性能，采用Von Kossa和ALP染色法和RT-PCR分析法檢測UC-MSCs向成骨細(xì)胞的分化，并且比較這三種PHA生物材料支架在成骨組織工程中的應(yīng)用。

3、　　 本論文將UC-MSCs植入PHBHHx、P3HB4HB和PHBVHHx支架內(nèi)培養(yǎng)不同的天數(shù)，與在24孔細(xì)胞培養(yǎng)板內(nèi)培養(yǎng)相比，支架對細(xì)胞生長有明顯的促進(jìn)作用，并且，PHBVHHx對細(xì)胞生長的促進(jìn)作用最強(qiáng)。通過對物理性能的檢測表明：在這三種PHA材料中，P3HB4HB的硬度最大，比較脆，PHBVHHx最軟，韌性最好，PHBHHx 介于兩者之間。Von Kossa和ALP染色法顯示：在PHBHHx、P3HB4HB和PHBVHHx支架內(nèi)

4、，UC-MSCs能夠分化為成骨細(xì)胞，在支架內(nèi)可見黑色鈣沉淀和紅色堿性磷酸酶(alkaline phosphatase)的表達(dá)。采用RT-PCR方法檢測成骨分化特異性基因的表達(dá)也進(jìn)一步證明：這三種PHA材料能夠支持UC-MSCs的成骨細(xì)胞。綜上所述，PHBHHx、P3HB4HB和PHBVHHx支架具有很好的生物相容性，能夠促進(jìn)UC-MSCs的生長和支持UC-MSCs向成骨細(xì)胞的分化，其中PHBVHHx支架促進(jìn)UC-MSCs生長的能力最強(qiáng)。