Fimbria區(qū)邊緣部分調(diào)控海馬齒狀回神經(jīng)發(fā)生的初步研究.pdf

1、海馬為大腦的古皮質(zhì),在認(rèn)知、學(xué)習(xí)記憶、情感等腦高級功能中發(fā)揮重要作用。越來越多的研究表明海馬尤其是齒狀回的發(fā)育與精神類疾病的發(fā)生密切相關(guān),因此對海馬齒狀回神經(jīng)發(fā)育調(diào)控機(jī)制進(jìn)行研究具有重要的現(xiàn)實(shí)意義。在齒狀回的發(fā)育形成過程中,Cortical hem區(qū)起著非常重要的調(diào)控作用。作為海馬發(fā)育的調(diào)控中心,許多信號分子及受體在cortical hem區(qū)表達(dá),Wnt信號通路的相關(guān)分子為其中的一類。為了明確cortical hem在海馬發(fā)育中的功能,

2、我們篩選了多種可能參與調(diào)控海馬發(fā)育的候選基因.本課題借助原位雜交的方法詳細(xì)地檢測了Writ受體之-Frizzled10基因在小鼠神經(jīng)系統(tǒng)中的表達(dá)情況。表達(dá)譜分析發(fā)現(xiàn),在胚胎期E8.5天和E9.5天,Frizzled10基因表達(dá)在神經(jīng)管及其末端的尾芽。至E10.5天,在前腦泡、第四腦室和脊髓均可以檢測到Frizzled10 mRNA。從E12.5天和E16.5天,在端腦Frizzled10特異性表達(dá)在Cortical hem區(qū)。此外,在丘

3、腦、室管膜區(qū)、小腦及脊髓均可以檢測到Frizzled10 mRNA。出生后,Cortical hem的區(qū)域逐漸被海馬傘(fimbria)取代,其殘余部分被擠壓至fimbria邊緣,但是P0仍然可以觀察到Frizzled10較強(qiáng)地表達(dá)在fimbria邊緣,之后逐漸變?nèi)?P4天以后基本檢測不到信號。該結(jié)果提示Frizzled10可能對海馬的神經(jīng)發(fā)生起著重要調(diào)控作用。為了更好地研究coritcal hem及其退縮部分海馬傘邊緣區(qū)域?qū)ｑR神經(jīng)發(fā)

4、生的調(diào)節(jié),我們利用Frizzled10啟動子制作了Fzd10Cre-ERTM轉(zhuǎn)基因小鼠,對出生后海馬的發(fā)育進(jìn)行研究。通過解析Fzd10Cre-ERTM轉(zhuǎn)基因小鼠,發(fā)現(xiàn)Cre表達(dá)模式與內(nèi)源性Frizzled10基因表達(dá)基本一致,提示此小鼠可用于研究coritcalhem和海馬傘邊緣區(qū)域在調(diào)控齒狀回發(fā)育中的作用。我們將Fzd10Cre-ERTM轉(zhuǎn)基因小鼠和Rosa26-Cre-reporter小鼠交配,在特定時(shí)間誘導(dǎo)Cre蛋白起作用,啟動報(bào)

5、告基因LacZ/GFP的表達(dá)。在出生后P0天注射tamoxifen,細(xì)胞譜系分析發(fā)現(xiàn)Cre陽性細(xì)胞及其子代細(xì)胞發(fā)育成為fimbria區(qū)發(fā)出的膠質(zhì)支架fimbriabundle和MZ區(qū)的reelin、GFAP、Calretinin陽性的細(xì)胞,這些細(xì)胞圍繞在發(fā)育中的齒狀回周圍,形成了包繞在齒狀回周圍的一個(gè)sheath。將Fzd10Cre-ERTM轉(zhuǎn)基因小鼠和Rosa26-GFP-DTA小鼠交配,并經(jīng)過tamoxifen誘導(dǎo)特異性去除shea