hsa-miRNA-125a下調(diào)SIRT6抑制膀胱癌進(jìn)展的機(jī)制.pdf

1、背景及目的：膀胱癌是一種發(fā)病率高、復(fù)發(fā)率高，易轉(zhuǎn)移的泌尿系統(tǒng)惡性腫瘤，目前膀胱癌的發(fā)病機(jī)制尚不清楚，可能與原癌基因的激活、抑癌基因的失活、染色體異常以及內(nèi)外環(huán)境共同作用有關(guān)。miRNA是一種長度約18-22nt的單鏈小分子非編碼RNA，通過與靶mRNA特異的堿基配對引起靶mRNA的降解或翻譯抑制，在轉(zhuǎn)錄后水平調(diào)控基因表達(dá)，從而調(diào)控細(xì)胞分化、生長、增殖、代謝和凋亡等。SIRT6是sirtuin蛋白家族成員之一，是NAD+依賴的去乙?；?，

2、在維持基因組和端粒的穩(wěn)定、調(diào)控炎癥反應(yīng)、糖和脂類代謝方面都發(fā)揮重要作用，同時對抗衰老起著重要的作用，與腫瘤發(fā)生發(fā)展存在密切聯(lián)系。本研究中，我們探索hsa-miRNA-125a下調(diào)SIRT6在膀胱癌中的表達(dá)發(fā)揮抑癌作用的機(jī)制。
　　方法與結(jié)果：利用實(shí)時熒光定量 PCR技術(shù)檢測了hsa-miRNA-125a及SIRT6在膀胱癌組織及細(xì)胞中的表達(dá)，與配對的癌旁正常組織或正常尿路上皮細(xì)胞相比，hsa-miRNA-125a在膀胱尿路上皮癌組

3、織及癌細(xì)胞系中表達(dá)下調(diào)，SIRT6在膀胱尿路上皮癌組織及癌細(xì)胞中表達(dá)上調(diào)。采用基因功能增強(qiáng)或喪失的方法分別研究兩者對膀胱癌細(xì)胞生長的影響。轉(zhuǎn)染hsa-miRNA-125a mimic可以降低膀胱癌細(xì)胞增殖效率，促進(jìn)膀胱癌細(xì)胞的凋亡，抑制膀胱癌細(xì)胞遷移,干擾SIRT6 mRNA得到與轉(zhuǎn)染hsa-miRNA-125a mimic相似的結(jié)果。雙熒光素酶報告基因檢測證明兩者存在結(jié)合靶點(diǎn)，最后，轉(zhuǎn)染SIRT6開放閱讀編碼框后，轉(zhuǎn)染hsa-miRN