無脈絡膜癥的基因篩查與臨床表型分析.pdf

1、目的:
　　明確國人無脈絡膜癥(choroideremia，CHM)突變位點，分析CHM患者臨床表型特征，探索基因型與臨床表型的關系。
　　方法:
　　收集2009～2013年于北京協(xié)和醫(yī)院眼科就診并診斷為CHM的患者及其家族成員。
　　1.臨床研究:詢問病史、家族史并繪制家系圖，行眼科一般檢查（視力、屈光度、眼前節(jié)、眼底）、色覺檢查、眼底彩色照相、相干光斷層掃描(optical coherence tomogr

2、aphy，OCT)、眼底自發(fā)熒光成像、視網膜電圖(electroretinogram，ERG)以及視野(visual field，VF)檢查。
　　2.分子遺傳學研究:采集患者及家族成員靜脈血5～6ml，同時收集同期正常人作為對照，提取DNA。針對，基因的15個外顯子及外顯子-內含子接合處進行聚合酶鏈式反應(polymerase chain reaction，PCR)擴增及直接測序。發(fā)現DNA序列改變后，進行單核苷酸多態(tài)性(sin

3、gle nucleotide polymorphism，SNP)分析，以除外已知正常多態(tài)位點，并查閱遺傳學數據庫及文獻，明確是否為已報突變。若為新發(fā)突變，對100條染色體進行該位點的擴增、測序，以排除未知多態(tài)位點可能。
　　結果:
　　1.共收集13個家系資料，確定男性患者51例，女性攜帶者52例。其中24例男性患者及21例女性攜帶者接受臨床檢查。男性患者中，87.5％在兒童及青少年期出現夜盲，46.7％存在色覺異常，就診時

4、最佳矯正視力(best-corrected visual acuity, BCVA)介于光感～1.0。眼底表現:視網膜色素上皮(retinal pigment epithelium，RPE)層及脈絡膜毛細血管層呈不同程度萎縮，可暴露脈絡膜大血管及鞏膜;黃斑區(qū)可正?；蛭s;2例患者存在大量片狀棕黑色色素沉著。OCT:IS/OS層消失、RPE層不連續(xù)是主要改變，嚴重病例出現中心凹形態(tài)消失、神經上皮厚度變薄。自發(fā)熒光:大部分患者僅在黃斑區(qū)殘留

5、正常熒光。ERG:83.3％的患眼呈暗視反應熄滅型，58.3％的患眼呈明視反應熄滅型。女性攜帶者，均無夜盲主訴、無色覺異常，就診時BCVA介于0.3～1.5。眼底表現:以斑駁樣色素變動為特征，其中5例攜帶者特別表現為黃白色類似玻璃膜疣樣色素變動。OCT:絕大多數呈正常表現，玻璃膜疣樣色素變動區(qū)域在OCT上對應RPE層局限性中高信號物質堆積。自發(fā)熒光:呈斑駁樣低熒光表現。
　　2.10個參與分子遺傳學研究的家系全部明確了突變位點:包

6、括3種無義突變，5種剪接突變，1種小片段缺失突變，1種小插入缺失突變。70％為新發(fā)突變。
　　結論:
　　1.臨床表型:男性患者多于兒童及青少年期以夜盲起病，視力水平隨年齡下降，色覺異常與中心視力相關;RPE及脈絡膜萎縮是普遍眼底表現，晚期可累及黃斑。女性攜帶者多無臨床癥狀，視力水平隨年齡下降不明顯;斑駁樣色素變動是普遍眼底表現。
　　2.基因型-臨床表型關系:相似突變位點及類型存在臨床異質性，相似臨床表型存在遺傳異質