離果山羊草殺配子染色體3C的甲基化水平研究.pdf

1、本研究分別以普通小麥中國春（CS）、中國春-3CSAT3CSAT殺配子染色體二體附加系（CS-3CSAT3CSAT）、中國春-3C3C殺配子染色體二體附加系（CS-3C3C）三種小麥為材料。在細胞學(xué)實驗中，分別100μmol/L濃度的5-氮胞苷（5-AC）對三種小麥材料進行處理，對后期末期染色體的畸變率進行統(tǒng)計。取三種小麥品系的花藥對其進行DNA甲基化水平的檢測。將甲基化檢測實驗中所得出的與甲基化有關(guān)的差異帶進行回收、克隆、測序及序列分

2、析。主要研究結(jié)果如下：
　　1.5-氮胞苷處理對小麥根尖的細胞學(xué)影響：
　　未經(jīng)過去甲基化處理的普通小麥 CS中及殺配子染色體二體附加系中都沒有大量的染色體畸變的出現(xiàn)，而經(jīng)過100μmol/L濃度的5-AC處理后殺配子染色體二體附加系小麥的根尖出現(xiàn)了大量的染色體斷裂、落后染色體、染色體橋和微核等畸變形式，在不含殺配子染色體的普通小麥 CS中則不產(chǎn)生上述的畸變形式。且CS-3C3C的畸變率幾乎為CS-3CSAT3CSAT的兩倍

3、。
　　2.甲基化敏感擴增多態(tài)性法對小麥甲基化水平的檢測
　　通過MSAP技術(shù)檢測到花藥時期的殺配子染色體二體附加系CCGG位點的甲基化水平均高于普通小麥，與普通小麥相比殺配子染色體雙體附加系的CCGG位點上發(fā)生了明顯的甲基化模式變異，其中以CNG位點的升高為主。
　　3.殺配子染色體甲基化變異位點的序列分析
　　測序結(jié)果顯示，殺配子染色體二體附加系與普通小麥CS相比，甲基化發(fā)生變異的位點主要涉及到轉(zhuǎn)座子及蛋白功