小麥NL26-3C殺配子染色體單體附加系的miRNA高通量測(cè)序研究.pdf

1、來(lái)自山羊草屬的某些染色體，在單體附加到不同基因型的普通小麥中時(shí)，具有完全或不完全的殺配子作用，在不完全殺配子作用下，可高頻率誘導(dǎo)各種類(lèi)型的染色體結(jié)構(gòu)變異，在小麥遺傳育種中發(fā)揮著重要的作用。但是殺配子染色體的分子作用機(jī)制至今還不清楚。
　　本研究創(chuàng)制NL26-3C殺配子染色體單體附加系材料，對(duì)NL26與NL26-3C單體附加系的花藥組織進(jìn)行miRNA高通量測(cè)序，以TaqMan檢測(cè)技術(shù)驗(yàn)證高通量測(cè)序的結(jié)果。篩出與殺配子作用相關(guān)的miR

2、NA，為揭示殺配子染色體的分子作用機(jī)制奠定基礎(chǔ)。主要研究結(jié)果如下：
　　1.以NL26為母本，NL26-3C殺配子染色體二體附加系為父本進(jìn)行雜交，獲得F1代材料。以3C特異SCAR標(biāo)記對(duì)F1材料進(jìn)行鑒定，證明了其含有3C殺配子染色體。對(duì)F1代材料根尖進(jìn)行染色體制片觀察，結(jié)果顯示，染色體數(shù)為43條，確定雜交獲得的F1代材料為NL26-3C殺配子染色體單體附加系。
　　2.對(duì)NL26和NL26-3C單體附加系花藥進(jìn)行高通量測(cè)序，

3、獲得來(lái)自77個(gè)家族的133個(gè)已知miRNA，4個(gè)新miRNA。其中有9個(gè)miRNA在NL26-3C單體中表達(dá)顯著高于NL26，11個(gè)miRNA在NL26中表達(dá)顯著高于NL26-3C。對(duì)差異表達(dá)miRNA進(jìn)行了靶基因功能預(yù)測(cè)。結(jié)果顯示，這些miRNA主要行使分子結(jié)合、酶的催化等功能，參與了細(xì)胞形成、細(xì)胞代謝等過(guò)程。
　　3.選取差異表達(dá)的miR9657b-3p，應(yīng)用TaqMan技術(shù)檢測(cè)它在NL26和NL26-3C中的表達(dá)量。結(jié)果顯示