羊膜提取液對(duì)兔準(zhǔn)分子激光術(shù)后haze的影響機(jī)制.pdf

1、目的:
　　探討羊膜提取液(amniotic extraction, AE)對(duì)準(zhǔn)分子激光屈光性角膜切削術(shù)(photorefractive keratectomy, PRK)后傷口愈合過(guò)程的影響及減輕PRK術(shù)后角膜上皮下霧狀混濁(haze)的作用機(jī)制。
　　方法:
　　健康無(wú)眼疾的27只新西蘭大白兔(54只眼),采用完全隨機(jī)分組設(shè)計(jì)方案,隨機(jī)分為三組(實(shí)驗(yàn)組、激素組與空白組),每組9只兔(18只眼)。制造PRK動(dòng)物模型(

2、PTK模式下去除兔角膜上皮,PRK治療模式下按-10D、6.5mm切削直徑進(jìn)行角膜切削)。術(shù)后實(shí)驗(yàn)組滴用AE,激素組用0.1％磷酸地塞米松眼液,空白組用不含AE的賦形劑,術(shù)后每天觀察眼部大體情況。于1、4、8W處死每組3只實(shí)驗(yàn)兔,取雙眼角膜組織,采用光鏡觀察角膜切削區(qū)中央上皮的恢復(fù)情況,免疫熒光染色檢測(cè)α-平滑肌肌動(dòng)蛋白(alpha-smooth musclea actin,α-SMA)、CD11b,原位末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶介導(dǎo)的dUT

3、P缺口末端標(biāo)記(TUNEL)檢測(cè)角膜基質(zhì)細(xì)胞的凋亡,并進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。
　　結(jié)果:
　　1、術(shù)后1W,光學(xué)顯微鏡下見(jiàn),三組的角膜上皮細(xì)胞均已完全覆蓋激光切削面,上皮基底細(xì)胞大小不均,上皮細(xì)胞層間排列極不規(guī)則,基質(zhì)淺層有較多角膜基質(zhì)細(xì)胞積聚。術(shù)后4W,激素組和空白對(duì)照組基質(zhì)淺層內(nèi)較多新生膠原,排列不規(guī)則,失去板層結(jié)構(gòu),瘢痕形成。術(shù)后8W,三組角膜上皮仍未恢復(fù)至正常,角膜激素組和空白組基質(zhì)淺層見(jiàn)大量新生膠原纖維,排列極不規(guī)則(圖

4、1-4)。
　　2、術(shù)后1、4、8W CD11b在三組均未見(jiàn)明顯陽(yáng)性細(xì)胞表達(dá)。三組比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
　　3、術(shù)后1W TUNEL陽(yáng)性細(xì)胞在三組均有表達(dá),AE組較空白對(duì)照組、激素組的陽(yáng)性細(xì)胞明顯減少;術(shù)后4W TUNEL陽(yáng)性細(xì)胞在空白對(duì)照組有表達(dá),AE組、激素組未見(jiàn)明顯的陽(yáng)性細(xì)胞表達(dá)(p<0.01)。術(shù)后8W三組均未見(jiàn)明顯凋亡陽(yáng)性細(xì)胞的表達(dá)。
　　4、術(shù)后1、4、8Wα-SMA在空白對(duì)照組、激素組的角膜基質(zhì)淺層均有陽(yáng)性