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文檔簡介
1、背景:胃癌是最常見的惡性腫瘤之一,也是全球范圍內(nèi)死亡率第二位的惡性腫瘤,對人類健康造成了嚴(yán)重的威脅。近年來,表觀遺傳調(diào)控在腫瘤的發(fā)生發(fā)展中的作用已引起廣泛的關(guān)注,已有研究揭示DTWD1在胃癌中可能發(fā)揮腫瘤抑制作用,p53是其轉(zhuǎn)錄調(diào)控因子,而它的表達(dá)受到HDAC3的抑制,但是揭示DTWD1在胃癌發(fā)揮腫瘤抑制作用的證據(jù)尚不充分,而且其在胃癌的作用機(jī)制仍不清楚。
目的:目前本實(shí)驗(yàn)室前期實(shí)驗(yàn)結(jié)果證實(shí)DTWD1受到p53的轉(zhuǎn)錄調(diào)控,且它
2、的表達(dá)受到HDAC3的抑制,但是DTWD1具體作用機(jī)制和生物學(xué)功能尚未得到充分確定。我們希望通過一系列體內(nèi)體外實(shí)驗(yàn)來明確DTWD1基因的生物學(xué)功能及其抑制腫瘤發(fā)生發(fā)展的的調(diào)控機(jī)制。本研究中將進(jìn)一步證實(shí)DTWD1是一個在胃癌發(fā)生發(fā)展過程中新的腫瘤相關(guān)抑制因子;探究DTWD1通過何種機(jī)制發(fā)揮其抑制腫瘤的作用。
方法:首先我們構(gòu)建Doxcycline(DOX)誘導(dǎo)DTWD1穩(wěn)定表達(dá)的細(xì)胞株,用人工計數(shù)做生長曲線的方法,觀察外源性DT
3、WD1對細(xì)胞表型的影響,再建立裸鼠成瘤模型進(jìn)一步驗(yàn)證體內(nèi)DTWD1對腫瘤生長的影響。運(yùn)用Western Blot,流式細(xì)胞儀測周期及凋亡,免疫組化,衰老檢測等方法闡明DTWD1抑制腫瘤發(fā)生發(fā)展的機(jī)制。
結(jié)果:本研究中進(jìn)一步證實(shí)DTWD1在胃癌中發(fā)揮腫瘤抑制因子的作用,DTWD1通過使細(xì)胞阻滯在細(xì)胞周期的G2/M期發(fā)揮其生物學(xué)功能。體內(nèi)外實(shí)驗(yàn)均證實(shí)DTWD1能有效抑制腫瘤細(xì)胞的生長。在本研究中DTWD1對胃癌細(xì)胞的凋亡,衰老以及
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