環(huán)氧合酶-Ⅱ(COX-2)對大鼠骨折愈合的影響實驗研究.pdf

1、目的：本實驗主要從提高及降低骨折大鼠體內(nèi)COX-2含量從骨折早期短期及長期使用相關(guān)藥物觀察骨折愈合情況，為臨床骨折患者保守及手術(shù)治療加速骨折愈合及降低骨折不愈合率提供了新的治療方案。
　　方法：
　　1.有蚌埠醫(yī)學(xué)院動物實驗室提供同一窩48只雄性大鼠，飼養(yǎng)后進行大鼠股骨中段開放性橫行骨折并用髓內(nèi)釘固定模型后隨機分為三組。其中A組為空白組（16只）；B組為COX-2抑制組（16只）；C組為實驗組（提高大鼠體內(nèi)COX-2含量16

2、只）。國內(nèi)進行的大鼠股骨骨折實驗?zāi)Ｐ偷慕⒋蠖嗖捎猛庠趹?yīng)力的作用下行閉合折骨方法，骨折大部分采用不固定或簡單外固定，由于術(shù)后大鼠骨折閉合折骨的骨折類型難以確定統(tǒng)一，術(shù)后對比性及可靠性較差。所以本實驗采用的開放截骨法．雖然軟組織創(chuàng)傷較閉合骨折方式大，但由于各組大鼠骨折實驗動物創(chuàng)傷程度基本相同，使用的內(nèi)固定材料可靠。實驗結(jié)果與現(xiàn)實對比，實驗結(jié)果將有更多的借鑒意義。
　　2.骨折造模后予以A組予以生理鹽水靜脈注射；B組采用塞來昔布（co

3、x-2抑制劑）混懸液24mg/kg·d。C組予以（cox-2試劑1uM/kg·d）靜脈給藥。各組大鼠進行骨折造模后并進行相關(guān)藥物處理后分別于2、4、6、8周進行放射學(xué)（X線）檢查，同時有2位醫(yī)生評價骨痂生長情況，同時對大鼠骨折愈合進行盲法評分。各項指標(biāo)采集后每2周各組大鼠隨機處死4只行大體標(biāo)本及組織學(xué)檢測，大體標(biāo)本進行福爾馬林浸泡后脫鈣HE染色并進行光學(xué)顯微鏡下觀察各組骨折端骨小梁密度。同時對各時間段大鼠提取1ml血清行BMP-2檢查。

4、本實驗只要采用SPSS19.0統(tǒng)計學(xué)軟件進行統(tǒng)計學(xué)分析。
　　結(jié)果：實驗中五5只實驗大鼠骨折模型建立后由于手術(shù)中麻醉、術(shù)后互相撕咬及骨折內(nèi)固定失敗等原因剔除并及時進行增補。
　　1．放射性（X線）檢查：A組為空白組即生理鹽水組骨折處骨痂生長一般。第二周大鼠骨折處骨折線較清晰，第四周大鼠骨折處骨折線模糊，第六周大鼠骨折處骨折線開始模糊消失并出現(xiàn)骨痂塑性，8周骨折基本愈合。B組為COX-2抑制組大鼠骨折處骨痂生長較空白組較晚，第

5、四周大鼠骨折處骨折線出現(xiàn)模糊影不清，骨痂生長較空白組明顯減少，第六周后骨折處骨折線已逐漸消失但仍可見骨痂的存在，術(shù)后第八周骨折處骨折愈合良好且骨折端骨痂吸收塑性等。COX-2抑制組短期（2.4周）及長期（6.8周）治療骨折愈合較空白組差異顯著（P<0.05）。C組為實驗組2周骨折線稍模糊，4周并出現(xiàn)少量骨痂并骨折線不明顯，6周骨痂生長模型并有塑性。8周骨折已愈合并接近正常結(jié)構(gòu)。實驗組短期和長期用藥較A組骨折愈合較明顯（P<0.05）。<

6、br>　　2.組織學(xué)檢查：A組為生理鹽水組大鼠骨折術(shù)后四周骨折端顯微鏡下可見骨小梁排列較整齊，骨折處周圍骨痂表現(xiàn)為纖維組織和少量軟骨組織， B組為COX-2抑制組4周（短期用藥）骨小梁相對稀薄，見較多軟骨細(xì)胞生長，骨痂形態(tài)見大量纖維組織軟骨組織值低于對照組(P<0.05)，C組為實驗組短期用藥骨小梁緊密，軟骨細(xì)胞生長旺盛，骨痂形態(tài)軟骨組織多于纖維組織較空白組明顯差異（P<0.05）, B組COX-2抑制組第8周(長期用藥)骨小梁稀疏，顯

7、微鏡下可見骨小梁排列紊亂，同時骨小梁之間連續(xù)性較差散在分布，間距增寬，骨痂形態(tài)主要表現(xiàn)在軟骨組織和等量不成熟骨組織明顯低于對照組(P<0.005)；C組（8周）長期用藥組骨密度較高，骨小梁排列整齊，骨痂形態(tài)表現(xiàn)為不成熟骨組織伴有成熟骨組織且明顯高于 A組（P<0.05）。
　　3.骨形態(tài)發(fā)生蛋白(BMP-2）濃度測量：術(shù)后各組進行BMP-2含量檢測， B、C組短期及長期用藥組與空白組相比有明顯差別(P<0.05)。
　　結(jié)論