水飛薊素對大鼠骨折愈合影響的實(shí)驗研究及FGF-2的表達(dá).pdf

1、目的：通過組織形態(tài)學(xué)和影像學(xué)的方法研究水飛薊素silymarin（SIL）在不同時段促進(jìn)大鼠脛骨骨折的效果。同時通過免疫組化觀察成纖維細(xì)胞生長因子2（fibroblast growth factor-2，F(xiàn)GF-2）在骨折端骨痂中的表達(dá)狀況。
　　方法：選取健康雌性SD大鼠72只，8周齡，采用開放式截骨骨折模型，造模成功后隨機(jī)分三組，A組為空白對照組（Control組），B組給予水飛薊素100mg/Kg/d灌胃（SIL-L組），C

2、組給予水飛薊素200mg/Kg/d灌胃（SIL-H組），分別在2、4、6周用X線檢查評判骨折愈合的平均愈合分?jǐn)?shù)。行血清生化檢查：堿性磷酸酶Alkaline Phosphatase ALP、谷丙轉(zhuǎn)氨酶Glutamate-puruvate Transaminase ALT、谷草轉(zhuǎn)氨酶Glutamic-oxaloacetic Transaminase AST、血清肌酐Creatinine Cr、血尿素氮Blood Urea Nitrogen

3、BUN、血清鈣Ca2+，在術(shù)后2、4、6周各組分別處死8只大鼠測量離體大鼠脛骨骨礦物質(zhì)密度（Bone Mineral Density BMD）。組織行蘇木精-伊紅染色（hematoxylin eosin staining,HE）觀察骨折愈合的病理變化，免疫組織化學(xué)（immunohistochemistry）染色檢測骨痂中FGF-2的表達(dá)水平。所得實(shí)驗數(shù)據(jù)采用SPSS22.0統(tǒng)計學(xué)軟件分析。
　　結(jié)果：
　　1、放射學(xué)檢查：術(shù)

4、后2周時，三組大鼠骨折處均可見明顯骨痂生長；術(shù)后4周時，三組大鼠骨折線均開始模糊，骨痂體積明顯減少；6周時，三組均有部分大鼠已達(dá)到骨性愈合，髓腔部分再通。骨折愈合評分術(shù)后2、4周可見SIL-L、SIL-H組骨痂生成量均比Control組增多（P<0.05），但SIL-L、SIL-H組間無明顯差異（P>0.05）。術(shù)后6周，三組間均無統(tǒng)計學(xué)差異（P>0.05）。
　　2、HE染色：組織學(xué)觀察顯示在術(shù)后第2周三組骨折端均以纖維組織和軟

5、骨組織為主，術(shù)后第4周時纖維組織逐漸被不成熟骨組織代替。組織學(xué)評分在第2及第4周時兩組觀察組與 Control組間有統(tǒng)計學(xué)差異(P<0.05)，而觀察組間無明顯差異(P>0.05)；第6周時，對比Control組及SIL-L組，SIL-H組軟骨內(nèi)成骨過程明顯增快，骨折線較Control組及SIL-L組明顯模糊，組織學(xué)評分SIL-H組與SIL-L組和Control組間明顯存在差異(SIL-H VS SIL-L:P<0.05;SIL-H V

6、S Control:P<0.01)，但Control組和SIL-L組間無明顯差異(P>0.05)。
　　3、血清ALP水平：在術(shù)后2周，表現(xiàn)出SIL-H組高于Control組(P<0.01)和SIL-L組(P<0.05)。SIL-L組與Control組無統(tǒng)計學(xué)差異，但在第4、第6周，三組ALP含量無明顯統(tǒng)計學(xué)差異(P>0.05)。
　　4、大鼠離體脛骨骨礦物質(zhì)密度（BMD）：BMD值在三個時段均顯示SIL-H組和SIL-L組

7、高于Control組(P<0.05)。SIL-H組三個時段均高于SIL-L組，但兩組間無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。
　　5、血清Ca2+水平：血清Ca2+顯示在術(shù)后第2周，SIL-H組和SIL-L組低于Control組(P<0.05)，SIL-H組和SIL-L組間無統(tǒng)計學(xué)差異(P>0.05).。但在術(shù)后第4周、第6周三組無明顯統(tǒng)計學(xué)差異。
　　6、免疫組化：術(shù)后第2周對照組及觀察組在成纖維細(xì)胞、成軟骨細(xì)胞、成骨細(xì)胞、和骨基

8、質(zhì)中表達(dá)均增加，三組均達(dá)到高峰，2周時兩觀察組表達(dá)較Control組增高，組間有明顯統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.01），SIL-H組高于SIL-L組，組間有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.01）。術(shù)后第4、6周，觀察組及Control組表達(dá)均較2周下降，第4周觀察組較Control組表達(dá)明顯增加（P<0.01），SIL-H組與SIL-L組組間表達(dá)存在統(tǒng)計學(xué)差異（P<0.05）。術(shù)后第6周，觀察組較對照組光密度值仍增高，但三組間對比無統(tǒng)計學(xué)差異（P>0.05

9、）。
　　7、谷丙轉(zhuǎn)氨酶、谷草轉(zhuǎn)氨酶、肌酐、尿素氮水平：術(shù)后第2、4、6周各組間血清ALT、AST、Cr、BUN水平無統(tǒng)計學(xué)差異（P>0.05）。
　　結(jié)論：
　　根據(jù)本實(shí)驗結(jié)果，我們可以得出以下結(jié)論：
　　1、水飛薊素能促進(jìn)大鼠骨折愈合。
　　2、水飛薊素可增加骨密度水平，早期增加ALP水平及減低血清Ca2+水平。
　　3、水飛薊素促進(jìn)大鼠骨折骨折愈合可能通過促進(jìn)FGF-2的表達(dá)相關(guān)。
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