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1、禽流感是由A型流感病毒引起的一種禽類(lèi)感染的疾病綜合癥,是危害目前養(yǎng)禽業(yè)最嚴(yán)重的疫病之一。已有研究表明H5N1-NS1蛋白可以作為診斷試劑來(lái)鑒別診斷免疫動(dòng)物和自然感染動(dòng)物,因而開(kāi)展NS1蛋白的研究在禽流感防治方面具有較高的應(yīng)用價(jià)值。 本研究將人工合成的H5N1-NS1基因克隆進(jìn)原核表達(dá)載體pET-28a(+)中,在大腸桿菌BL21中誘導(dǎo)表達(dá),結(jié)果表明:大腸桿菌中表達(dá)的重組蛋白分子量為31 kD,與理論值相符,此外還有一條分子量為1
2、5 kD左右的特異性條帶,推測(cè)與大腸桿菌密碼子的偏愛(ài)性或表達(dá)產(chǎn)物降解有關(guān);同時(shí)將H5N1.NSl基因克隆進(jìn)桿狀病毒轉(zhuǎn)移載體pFastBacHT A中,通過(guò)Bae toBae系統(tǒng)在Sf-9細(xì)胞中進(jìn)行表達(dá),表達(dá)的重組蛋白為33 kD,比預(yù)測(cè)的融合蛋白分子量30.5 kD略大,推測(cè)與表達(dá)產(chǎn)物的后加工有關(guān)。 開(kāi)展了基于DNA載體的RNAi抑制家蠶核多角體病毒(BmNPV)復(fù)制的研究。用人工合成“A3 promoter-Sence lef
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