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1、作為一種PAMP分子,病原細(xì)菌鞭毛素可以引發(fā)植物的免疫反應(yīng)(PTI),如細(xì)胞死亡、H2O2產(chǎn)生、活性氧爆發(fā)和胼胝質(zhì)沉積等。在激發(fā)植物 PTI時,許多細(xì)菌的鞭毛素的不同結(jié)構(gòu)域有不同的誘導(dǎo)效率,N端保守的22個氨基酸(flg22)區(qū)段比全長蛋白誘導(dǎo)擬南芥、煙草和番茄等植物更強(qiáng)的免疫反應(yīng),表明此區(qū)段是免疫反應(yīng)的誘導(dǎo)活性中心。燕麥?zhǔn)人峋ˋcidovorax avenae subsp. avenae,Aaa)水稻不親和亞種菌株N1141的鞭毛素
2、能引起水稻PTI,然而該蛋白N端保守的flg22卻缺乏此誘導(dǎo)功能,推測該鞭毛素誘導(dǎo)水稻PTI的功能域可能位于flg22以外的某個未知區(qū)段,有必要進(jìn)行深入的研究。
本研究首先分析了4個Aaa菌株誘導(dǎo)水稻PTI的能力,確定IPN1菌株具有誘導(dǎo)水稻免疫反應(yīng)的能力。在此基礎(chǔ)上,克隆獲得到了該菌株2個序列不完全相同的鞭毛素基因fliCaaa和fliC2aaa,兩者序列同源性達(dá)89.25%,都編碼含有492個氨基酸的蛋白,該蛋白具有fla
3、gellin-N和flagellin-C兩個保守結(jié)構(gòu)域。對鞭毛素基因flicaaa全長、N端和C端進(jìn)行了原核表達(dá),獲得了純化蛋白FliCaaa及其截短肽段FliCaaa-N和FliCaaa-C。通過浸潤接種處理水稻日本晴葉片組織,測定了它們誘導(dǎo)水稻免疫反應(yīng)的活性。結(jié)果發(fā)現(xiàn)3種蛋白均能夠誘導(dǎo)水稻細(xì)胞死亡和H2O2產(chǎn)生;FliCaaa誘導(dǎo)PR10a的表達(dá)量大約是FliCaaa-N和FliCaaa-C處理后表達(dá)量的4倍,表明FliCaaa引起
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