肉種雞場主要種源性疫病的流行情況研究.pdf

1、禽類種源性疾病(Disease of avian embryo)是一類由多病原引起的綜合性疾病，可造成禽胚發(fā)育受阻，胚胎死亡，孵化率降低，肉雞增重減慢、胴體降級和廢棄增多等現(xiàn)象，給養(yǎng)禽業(yè)帶來重大經(jīng)濟損失。 2005年3月份以來，山東某規(guī)模化從肉雞集團公司(飼養(yǎng)30萬套肉種雞，共分6個分場)三個父母代肉種雞分場的種雞群所產(chǎn)種蛋孵化時出現(xiàn)明顯的胚胎死亡、孵化率降低、弱雛增多，雛雞出現(xiàn)呼吸道癥狀，飼養(yǎng)到30天左右時，大腸桿菌及新城疫病

2、毒等的感染率明顯升高，出現(xiàn)雞只生長發(fā)育遲緩等現(xiàn)象。其他分場未出現(xiàn)類似情況，由此推測該病與種雞群有關(guān)。為了進一步探討引起該規(guī)模化種雞場種源性疫病的原因，本研究通過流行病學調(diào)查及病原學檢查，并對其主要病原進行了PCR檢測，為肉種雞場從源頭凈化該類疫病提供理論依據(jù)。 本研究共分3部分： 一、規(guī)模化種雞場種源性疫病病原學研究山東省某規(guī)?；瘡娜怆u集團公司(集種雞場、孵化場、商品雞場及肉品加工于一體)的種雞場現(xiàn)存養(yǎng)從肉種雞30萬套，

3、6個分場，各雞場呈地區(qū)分布，相距很遠。2005年3月份以來，其孵化場出現(xiàn)胚胎死亡、弱雛增多，孵出的雛雞30d左右出現(xiàn)免疫應答不良、生長緩慢等癥狀。通過對該大型從父母代肉種雞場中的三個分場產(chǎn)蛋雞及其所產(chǎn)種蛋孵出的ld商品雛雞、30"-40d商品雞的血清抗體檢測，J亞型禽白血病病毒(ALV-J)、雞傳染性貧血病病毒(CIAV)的平均陽性率分別為24.33％、5.00％，雞白痢(Pullorosis)、雞敗血支原體(MG)、滑液囊支原體(Ms

4、)、雞大腸桿菌(E.coli)和禽波氏桿菌(Bordetellaavium)的平均陽性率分別為13.59％、12.69％、5.97％、19.62％和6.72％，從死亡雞胚、肉仔雞弱雛和死雛、商品育成雞等內(nèi)臟器官進行病原學檢查，結(jié)果主要分離到大腸桿菌(36.00％)、沙門氏菌(24.73％)、支原體(19.53％)和禽波氏桿菌(12.33％)4種病原菌及Alv-J、CIAV兩種病毒。結(jié)果表明造成該病的主要原因是由大腸桿菌、沙門氏菌、支原體

5、、禽波氏桿菌及ALV-J、CIAV共感染種雞后，由種蛋垂直傳播到雞胚、雛雞造成的。二、主要免疫抑制病病原的分子生物學調(diào)查當雞群中存在免疫抑制性病毒的感染時，雞群將對其它病毒或細菌變得易感，而且感染的癥狀、病變不典型，并造成免疫失敗。本研究通過流行病學調(diào)查與病原學檢查，發(fā)現(xiàn)該場存在蛋傳遞性免疫抑制性病毒(ALV-J、cIAV)的感染。為了解該場是否存在蛋傳遞性病毒與其他免疫抑制性傳染因子的多重感染，本研究將采取的肉仔雞弱雛和死胚、商品育成

6、雞等的臟器(胸腺、、肝、脾、法氏囊、關(guān)節(jié)液及骨髓等)，分別按常規(guī)方法提取組織DNA與RNA，通過四重PCR方法檢測CIAV、MDV、REV、ALV-J，通過RT-PCR方法檢測IBDV和VAV，結(jié)果僅檢測到ALV-J和CIAV的存在，陽性率分別為9.50％和6.50％，這一結(jié)果顯示，ALV-J和CIAV感染是導致該雞場發(fā)生免疫抑制病的主要病因之一。 三、J亞群禽白血病病毒核衣殼蛋白p27基因的克隆與測序J亞群禽白血病病毒(Sub

7、group J of Avian leukosis virus，ALV-J)是90年代初由英國鑒定出來的禽白血病病毒(ALV)新的亞群，’主要引起肉雞的骨髓瘤白血病。近年來該病毒在世界范圍內(nèi)迅速傳播。我國于1999年首先在肉用型雞群中分離鑒定出了ALV-J的中國株(杜巖，崔治中等，1999)，并通過接種1日齡雛雞發(fā)現(xiàn)了一株急性轉(zhuǎn)化型毒株。此后，又在中國分離出了更多的毒株(張志，崔治中等，2002)。 病原學研究結(jié)果表明J亞群禽白

8、血病是造成從父母代肉種雞種源性疫病的主要病因之一(分離率為24.33％)，為進一步研究其分子生物學特性，本實驗根據(jù)已報道的ALV-J前病毒基因組gag P27序列設計了一對引物，通過RT-’PCR方法擴增出與報道相同的720bp基因片段，將擴增產(chǎn)物克隆到pMD 18-T載體中，轉(zhuǎn)化受體菌TG1，酶切鑒定陽性克隆，并對陽性克隆測序和分析，與已發(fā)表的ALV-J前病毒株序列進行比較。結(jié)果該片段編碼序列與國內(nèi)寧夏分離株(NX0101)的同源性達