GLP-1類似物對(duì)2型糖尿病大鼠腎臟的保護(hù)作用及其可能機(jī)制.pdf

1、目的：
　　本文旨在研究胰高血糖素樣肽-1（Glucagon-like peptide-1，GLP-1）類似物Exenatide對(duì)2型糖尿病大鼠腎臟的保護(hù)作用及其可能作用的機(jī)制。
　　方法：
　　8周齡雄性SD大鼠隨機(jī)分為三個(gè)實(shí)驗(yàn)組，即正常對(duì)照組（NC組）、糖尿病對(duì)照組（DM組）和GLP-1類似物-艾塞那肽（Exenatide）干預(yù)組（EX+DM組），以高脂高糖飲食聯(lián)合小劑量STZ腹腔注射誘導(dǎo)SD大鼠，建立2型糖尿病大

2、鼠模型，EX+DM組給予艾塞那肽（3μg/kg，bid，皮下注射）連續(xù)干預(yù)8周。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后檢測(cè)血糖、糖基化血紅蛋白（HbA1C)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白膽固醇（LDL-C）、高密度脂蛋白膽固醇（HDL-C），觀察Exenatide對(duì)各組大鼠代謝指標(biāo)的影響；檢測(cè)血肌酐、尿素氮、尿微量白蛋白排出率（24hour urine micro-albumin，24h UMA），觀察Exenatide對(duì)各組大鼠腎功能的影響；行腎臟在體灌流實(shí)驗(yàn)

3、，分析Exenatide對(duì)各組大鼠腎血管順應(yīng)性的影響；行光鏡及透射電鏡檢查，觀察Exenatide對(duì)各組大鼠腎組織的病理形態(tài)學(xué)的影響；實(shí)時(shí)熒光定量PCR檢測(cè)腎組織中轉(zhuǎn)化生長因子β1（Transforming growthfactor-1，TGF-β1）、纖維連接蛋白（Fibronectin1，F(xiàn)N1）、結(jié)締組織生長因子（Connective tissue growth factor，CTGF）表達(dá)水平，觀察Exenatide對(duì)各組大鼠纖

4、維化指標(biāo)的影響；檢測(cè)血清及腎組織丙二醛（Malondialdehyde，MDA）、超氧化物歧化酶（Superoxide dismutase，SOD）水平，觀察 Exenatide對(duì)各組大鼠氧化應(yīng)激功能的影響；檢測(cè)血清及腎組織晚期糖基化終末產(chǎn)物（Advanced glycation end products，AGEs）、晚期糖基化終末產(chǎn)物受體（Receptor for advanced glycation end products，RAG

5、E）及乙二醛酶-1（Glyoxalase-1，GLO-1）水平，觀察Exenatide對(duì)各組大鼠糖基化相關(guān)產(chǎn)物的影響。
　　結(jié)果：
　　1、DM組血糖（24.3+1.9 mo l/l）、Hb A1c（2.56+0.19 g/ml）、攝食量（37.7+2.1 g）、進(jìn)水量（148.3+5.6ml）明顯高于NC組（5.0+0.4mol/l；0.39+0.08 g/ml；20.5+1.7 g；27.1+0.4 ml）（P<0.00

6、1），EX+DM組血糖（19.4+2.1 mo l/l）、HbA1c（2.11+0.34g/ml）、攝食量（31.8+3.8 g）、進(jìn)水量（104.4+15.6 ml）較DM組顯著下降（P<0.01）。
　　2、NC組、DM組及EX+DM組血清尿素氮（54.2+12.0 mmol/l；60.1+10.8 mmo l/l；50.5+16.0 mmo l/l）、肌酐（7.1+1.2 umo l/l；8.3+2.6 umo l/l；8.

7、31+2.92 umo l/l）水平差別沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）；DM組腎指數(shù)（腎重 mg*1000/體重 g）（6.0+0.8）和24h UMA（564.2+125.6mg）明顯比NC組（3.0+0.3；74.7+9.3mg）升高（P<0.001），EX+DM組腎指數(shù)（5.10+0.5）和24h UMA（433.1+98.7mg）較DM組顯著下降（P<0.001）。
　　3、各組灌注流量和動(dòng)脈舒張壓力存在明顯線性相關(guān)，Pe

8、a rso n相關(guān)系數(shù)介于0.91-0.99之間。與NC組相比，DM組灌注流量-壓力曲線的斜率增大，提示腎血管順應(yīng)性較NC組下降（P<0.05），EX+DM組該曲線斜率較 DM組減小，提示腎血管順應(yīng)性較DM組增加（P<0.05）。
　　4、DM組腎小球基底膜增厚，個(gè)別腎小球硬化，大部分腎小球系膜區(qū)增寬，系膜細(xì)胞、系膜基質(zhì)增多，腎間質(zhì)炎癥細(xì)胞浸潤，EX+DM組腎組織上述形態(tài)學(xué)改變較DM組有所改善；DM組腎組織TGF-β1、FN1、C

9、TGF mRNA水平較NC組升高（P<0.05），EX+DM組較DM組有不同程度的下降（P<0.05）。
　　5、DM組腎組織TGF-β1、FN1、CTGF mRN A相對(duì)表達(dá)量明顯高于NC組（P<0.01），經(jīng)Exenatide干預(yù)的EX+DM組腎組織TGF-β1、FN1、CTGF mRNA相對(duì)表達(dá)量較DM組降低（P<0.05）。
　　6、DM組血清及腎組織SOD活力（91.9+18.0U/ml；106.0+30.5U/m

10、gprot）比NC組（分別為118.1+15.5U/ml；269.8+47.1U/mgprot）明顯降低（P<0.01），EX+DM組血清及腎組織SOD活力（分別為118.6+17.1U/ml；202.5+29.6U/mgprot）較DM組升高（P<0.05）；DM組血清及腎組織MDA含量（分別為10.5+0.7nmol/ml；1.2+0.4nmol/mgprot）比NC組（分別為9.1+0.9nmol/ml；0.6+0.2nmol/m

11、gprot）增加（P<0.05），EX+DM組血清及腎組織 MDA含量（分別為9.5+0.5nmol/ml；0.7+0.2 nmo l/mgprot）較DM組降低（P<0.05）。
　　7、DM組血清AGEs濃度（26.4+2.5ng/ml）、腎組織AGEs濃度（281.5+4.7pg/ml）及RAGE濃度（4.6+0.2ng/ml）明顯高于NC組（分別為15.0+0.1ng/ml；252.2+2.7p g/ml；3.1+0.2

12、ng/ml）（P<0.01），EX+DM組三項(xiàng)指標(biāo)（分別為15.4+0.2ng/ml；252+7.0pg/ml；3.0+0.2ng/ml）均明顯低于 DM組（P<0.001）；DM組血清GLO-1濃度（7.0+0.6ng/ml）、腎組織GLO-1 mRNA和蛋白質(zhì)水平低于 NC組（8.6+0.3ng/ml）（P<0.05），EX+DM組 GLO-1濃度（16.1+1.5ng/ml）、腎組織GLO-1 mRNA和蛋白質(zhì)水平均明顯高于DM組

13、大鼠（P<0.01）。
　　8、DM組腎組織胞外調(diào)節(jié)激酶1/2（Extracellular regulated kinase1/2，ERK1/2）基因和蛋白質(zhì)水平明顯高于NC組（P<0.05），EX+DM組ERK1/2表達(dá)低于DM組（P<0.05）。
　　結(jié)論：
　　GLP-1類似物Exenatide對(duì)2型糖尿病大鼠腎臟可能具有保護(hù)作用，其作用機(jī)制可能與改善糖化作用和改善氧化應(yīng)激損傷有關(guān)，提示Exenatide或許是糖