香菇中真菌毒素的篩查及發(fā)生規(guī)律研究.pdf

1、香菇（Lentinula edodes）營養(yǎng)價值豐富、味道鮮美，被人們譽為“菇中之王”、“天然的保健食品”、“植物性食品的頂峰”、“上帝的食品”等稱號，深受廣大消費者的青睞。但是香菇在栽培過程中處于溫暖潮濕的環(huán)境中，特別容易受真菌污染。真菌污染除了造成香菇產量損失外，更嚴重的是能產生對人畜有毒害作用的真菌毒素從而導致人們對香菇產品質量安全的擔憂。因此，香菇中真菌毒素污染是影響其質量安全的重要問題。本文首先建立香菇中真菌毒素的檢測方法，對

2、香菇樣品進行真菌毒素的篩查，同時，通過對病害香菇進行病原菌的分離與鑒定，了解香菇被真菌污染的情況，預測可能產生真菌毒素的真菌，最后對產毒真菌進行產毒規(guī)律研究。為控制香菇中真菌毒素的污染提供理論參考，從而確保香菇產品質量的安全。
　　本實驗研究成果主要歸結為以下三個方面：
　　1.以菇棚病態(tài)香菇、菌棒和市場上的晾干香菇為試驗樣本，從病菇中分離主要污染真菌，從而確定香菇中主要污染真菌的菌群，并對真菌的產毒表型進行分析。結果表明：

3、香菇從栽培到貯藏整個過程中污染真菌的種類，主要有哈茨木霉、茄腐鐮刀菌、黑曲霉和黑附球菌等。通過純培養(yǎng)特征、微觀形態(tài)特征、回接感染驗證及分子鑒定，確定主要污染真菌的種類為11種。
　　2.本研究針對香菇基質，建立了33種真菌毒素LC-MS/MS檢測方法，并對香菇樣品進行了真菌毒素篩查，查找在香菇中可能存在的真菌毒素。結果表明：前處理方法采用了不需要進一步凈化的簡單、便宜、快速、有效的QuEChERS方法，色譜柱為Agilent Po

4、roshell120 EC-C18柱（100 mmt Poroshell1），采用線性梯度洗脫，流動相為（A）醋酸銨水溶液和（B）甲醇。方法驗證線性（R2≥0.9990），靈敏度(LOQ≤19μg/kg)，回收率(73.6-117.9％)和準確度(0.8%-18.3%)，此方法成功應用于檢測香菇中的多種真菌毒素。30個香菇樣本進行篩查，共檢測到4種真菌毒素，濃度從3.3到28819.5μg/kg，為產毒菌株的預測提供了依據。
　　

5、3.從香菇中分離得到11株鐮刀菌，且都為茄腐鐮刀菌，通過對來源不同的茄腐鐮刀菌在不同基質中隨時間的產毒規(guī)律進行探究。結果發(fā)現：一，三株分離于香菇的茄腐鐮刀在玉米培養(yǎng)基中產生鐮刀菌酸（FA）和伏馬毒素(FB1和FB2)，在大米和香菇中只產生 FB，與對照菌株相比茄腐鐮刀菌在大米和玉米培養(yǎng)基中產毒量很低，在香菇培養(yǎng)基中產毒量較高，而對照菌株產毒卻受到抑制。隨時間的變化，茄腐鐮刀菌在大米培養(yǎng)基和香菇中產毒有顯著差異（P<0.05）；在玉米培養(yǎng)

6、基中產毒無顯著差異（P>0.05）。二，三株分別分離于香菇、青椒、玉米的茄腐鐮刀菌在不同培養(yǎng)基中隨時間的產毒規(guī)律研究發(fā)現：在大米培養(yǎng)基中，分離于香菇和青椒的菌株不產生 FA，只產生 FB，隨時間變化產毒量有顯著差異（P<0.05）；分離于玉米的菌株不產 FA，只產 FB，隨時間的變化產毒量無顯著差異（P>0.05）。在玉米培養(yǎng)基中，分離于香菇、玉米、青椒的菌株產生 FA和FB，隨時間的變化產毒量無顯著差異（P>0.05），三株菌株產毒總