拉莫三嗪和乙琥胺早期干預大鼠癲癇發(fā)作和神經保護的實驗研究.pdf

1、目的:在氯化鋰-匹羅卡品誘導顳葉癲癇模型的急性期用乙琥胺和拉莫三嗪干預，探討其對大鼠慢性自發(fā)期的抗癲癇和神經保護作用。
　　 方法:(l)動物模型:健康成年雌性wister大鼠，腹腔注射匹羅卡品誘發(fā)大鼠出現按Racine法分級的Ⅳ級以上無明顯間歇的癲癇持續(xù)狀態(tài)(statusepilepticus，SE)，SE持續(xù)60分鐘后注射地西泮終止發(fā)作，終止發(fā)作并存活的視為造模成功。正常對照組以等量的生理鹽水夫腹腔注射來代替其他組的用藥。將

2、造模成功的大鼠隨機分為5個組，即模型對照組、乙琥胺(ESM)低劑量（25mg/kg，2次/d）組、ESM高劑量（50mg/kg，2次/d）組、拉莫三嗪(LTG)低劑量（10mg/kg，2次/d）組;LTG高劑量（20mg/kg，2次/d）組，每組8只，給藥組于SE終止后24小時腹腔注射給藥，連續(xù)給藥10天。(2)觀測實驗過程中大鼠的癲癇發(fā)作（發(fā)作等級、發(fā)作頻率），并分析各組之間有無統(tǒng)計學差異。(3)通過Nissl染色、GFAP免疫組化染

3、色法，分別觀察海馬CA3、CAI區(qū)神經元丟失及星形膠質細胞增生的情況，用統(tǒng)計軟件分析各實驗組數據資料。
　　 結果:(1)匹羅卡品腹腔注射后5～60分鐘內依次出現外周膽堿能反應和Ⅰ～Ⅲ級發(fā)作，最后發(fā)展為Ⅳ、Ⅴ無明顯間歇的連續(xù)發(fā)作，即為SE。其SE首劑量誘發(fā)率為79.1％、總誘發(fā)率為88.3％，SE后的死亡率為12.1％。進入慢性期后可見與急性期發(fā)作相似的癲癇發(fā)作，時限不超過1分鐘。與模型組比較LTG用藥組每周發(fā)作次數顯著減少(p

4、＜0.05)且高劑量組發(fā)作頻率較低劑量組更少，差異有統(tǒng)計學意義(p＜0.05);ESM用藥組沒有觀察到發(fā)作次數的明顯減少(p＞0.05)，正常對照組無癇性發(fā)作。(2)SE后第7周模型組海馬CA3區(qū)神經元大量丟失，排列稀疏紊亂，尼氏體含量減少甚至消失，海馬CAI區(qū)的星形膠質細胞數量明顯增多，GFAP表達明顯增加、胞體腫脹;與模型組比較，LTG低、高劑量干預組海馬CA3、CAI區(qū)神經元損傷和膠質細胞增生明顯減少(p＜0.05)，且高劑量組顯

5、示出更好的神經保護作用，高低劑量組之間差異有統(tǒng)計學意義(p＜0.05);而ESM低、高劑量干預組海馬CA3、CAI區(qū)神經元丟失數量和GFAP染色陽性細胞數無明顯減少，差異無統(tǒng)計學意義(p＞0.05)。
　　 結論:(1)SE對大鼠海馬造成不可逆的損傷，導致海馬CA3、CAI區(qū)神經元大量丟失和星形膠質細胞的增生，提示二者可能參與癲癇發(fā)生。(2)LTG早期干預后能明顯減少慢性期癲癇發(fā)作次數，且明顯減輕海馬神經元丟失和抑制星形膠質細胞