針刺大椎穴啟動癲癇大鼠海馬神經(jīng)-免疫保護(hù)機(jī)制的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：
　　從癲癇大鼠海馬神經(jīng)元形態(tài)學(xué)改變、細(xì)胞凋亡以及免疫細(xì)胞因子表達(dá)的角度探討針刺大椎穴治療癲癇的機(jī)制。
　　方法：
　　健康SPF級別的成年雄性SD大鼠50只，隨機(jī)分為正常組和模型組。正常組兩組每組11只，模型組兩組每組14只，模型組需建立LiCL-PILO癲癇模型。其中，正常組分為正?？瞻捉M和正常大椎組，模型組分為模型空白組和模型大椎組。正?？瞻捉M和模型空白組只給予固定，固定30min，無針刺治療，正常大椎組和

2、模型大椎組分別給予大椎穴治療，均30min/次/日,中間隔10min行針，頻率為30次/min，用平補(bǔ)平瀉手法，治療周期總計(jì)10次。觀察大鼠一般情況以及日常表現(xiàn)。治療結(jié)束后，在麻醉狀態(tài)下取鼠腦，取腦過程需在冰上完成，將取出來的鼠腦，左側(cè)鼠腦用于做HE染色觀察神經(jīng)元形態(tài)學(xué)的改變；右側(cè)鼠腦，用于流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞凋亡以及用液相芯片技術(shù)檢測免疫細(xì)胞因子的表達(dá)。
　　結(jié)果：
　　1.一般情況及行為學(xué)結(jié)果：正?？瞻捉M和正常大椎組的大鼠

3、飲食二便可，行為均正常；模型空白組和模型大椎組大鼠在造模3-37min之間達(dá)到IV及以上癲癇發(fā)作，造模成功率為96%，治療后死亡率，模型大椎組與模型空白組相比，χ2為4.588，P值為0.032<0.05；對各組大鼠實(shí)驗(yàn)前、實(shí)驗(yàn)中間、實(shí)驗(yàn)后的體重進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，正?？瞻捉M與正常大椎組在實(shí)驗(yàn)中間體重比較P<0.05，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；模型空白組與模型大椎組在實(shí)驗(yàn)后體重比較P<0.05。
　　2.形態(tài)學(xué)結(jié)果：光鏡下對各組大鼠神經(jīng)元形態(tài)學(xué)的觀察，

4、其中，正?？瞻捉M和正常大椎組大鼠神經(jīng)元形態(tài)學(xué)之間相差不大，模型空白組與正常空白組和正常大椎組之間相比細(xì)胞數(shù)目減少，形態(tài)不完整，排列次序紊亂，而模型大椎組則介于正?？瞻捉M和正常大椎組與模型空白組之間。對每組每張片子中的CA1、CA3、DG區(qū)使用IPP6.0進(jìn)行正常與凋亡細(xì)胞計(jì)數(shù)得出，CA1區(qū)正常空白組與模型空白組正常和凋亡的神經(jīng)元細(xì)胞數(shù)目比較P<0.05；CA1區(qū)正常大椎組與模型大椎組正常和凋亡的神經(jīng)元細(xì)胞數(shù)目比較P<0.05；CA1區(qū)模

5、型空白組凋亡的神經(jīng)元細(xì)胞為(62.70±24.365)，模型大椎組凋亡的神經(jīng)元細(xì)胞為(37.60±19.399)，P>0.05，但是相比針刺大椎穴明顯降低了CA1區(qū)凋亡的神經(jīng)元數(shù)目。
　　3.各組SD大鼠海馬神經(jīng)元細(xì)胞凋亡結(jié)果：正常空白組與正常大椎組之間晚期凋亡率相比F=0.112，P=0.027，P<0.05，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；模型空白組與模型大椎組之間晚期凋亡率相比F=0.149，P=0.002，P<0.05，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義

6、；正?？瞻捉M與模型空白組相比，早期凋亡率Z=－2.611，P=0.008，P<0.05，晚期凋亡率Z=－2.619，P=0.008，P<0.05，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義；正常大椎組與模型大椎組相比，早期凋亡率F=0.747，P=0.008，P<0.05，晚期凋亡率F=0.135，P=0.000，P<0.05，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　4.細(xì)胞因子表達(dá)的結(jié)果：正常空白組與模型空白組之間相比，P<0.05，差異顯著的因子分別是IgM、IgG1