Nogo-A蛋白及其受體NgR在宮內(nèi)發(fā)育遲緩大鼠腦組織表達(dá)的研究.pdf

1、目的:
　　 胎兒宮內(nèi)發(fā)育遲緩(intrauterine growth retardation,IUGR)又稱(chēng)為胎兒生長(zhǎng)受限(fetal growth restriction,FGR),是指孕37周后,胎兒出生體重小于2500g,或低于同孕齡、同性別平均體重的兩個(gè)標(biāo)準(zhǔn)差,或低于正常體重的10個(gè)百分位數(shù)以下的新生兒。IUGR的圍生兒病死率為正常體重兒的8倍,患兒出生后常伴有神經(jīng)系統(tǒng)損害,如神經(jīng)運(yùn)動(dòng)功能異常、行為異常,智商及學(xué)業(yè)成就

2、較正常出生體重兒低、神經(jīng)行為發(fā)育落后等。IUGR兒神經(jīng)損傷持續(xù)存在的原因可能與腦內(nèi)存在神經(jīng)生長(zhǎng)抑制因子Nogo-A及其受體等有關(guān)。Nogo-A及其受體Nogo-R(簡(jiǎn)稱(chēng)NgR)對(duì)新生大鼠中樞神經(jīng)系統(tǒng)的發(fā)育及分化有重要作用。Nogo-A作為在胚胎發(fā)育期的重要分子與某些神經(jīng)生長(zhǎng)因子組成復(fù)雜的信號(hào)網(wǎng)絡(luò),保持平衡狀態(tài),持續(xù)表達(dá)于生后乃至成年,可能對(duì)生后中樞神經(jīng)系統(tǒng)的發(fā)育、分化及可塑性均有重要調(diào)控作用。NgR屬糖基磷脂酰肌醇錨定蛋白,具有多個(gè)富亮

3、氨酸的重復(fù)結(jié)構(gòu),它與Nogo-A的細(xì)胞外的結(jié)構(gòu)域Nogo-66特異性結(jié)合抑制中樞神經(jīng)系統(tǒng)的再生。本研究通過(guò)孕期全程低蛋白飲食的方法建立宮內(nèi)發(fā)育遲緩的動(dòng)物模型,觀察Nogo-A及其受體NgR在宮內(nèi)發(fā)育遲緩大鼠腦中表達(dá)的動(dòng)態(tài)變化,探討Nogo-A及受體NgR變化與IUGR仔鼠腦發(fā)育遲緩的相關(guān)關(guān)系。
　　 方法:
　　 1、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物選用中國(guó)醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供的8～10周的wistar大鼠,用孕期全程低蛋白飲食的方法建立I

4、UGR實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型,對(duì)照組(CON組)飼以正常飲食,IUGR的判斷標(biāo)準(zhǔn)為新生鼠出生體重低于正常對(duì)照組新生鼠出生體重的2個(gè)標(biāo)準(zhǔn)差的為IUGR鼠。
　　 2、將研究對(duì)象隨機(jī)分為0天組、7天組、14天組、21天組,分別計(jì)量各組實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的體重、腦重。
　　 3、用HE染色的方法動(dòng)態(tài)觀察實(shí)驗(yàn)組、對(duì)照組各階段仔鼠的腦組織的病理特征,用鍍銀法觀察實(shí)驗(yàn)組、對(duì)照組各階段仔鼠的髓鞘發(fā)育情況。
　　 4、用免疫組化ABC法動(dòng)態(tài)觀察IU

5、GR鼠的腦內(nèi)Nogo-A和NgR的表達(dá)改變情況。
　　 5、用Western-blot方法檢測(cè)不同生長(zhǎng)發(fā)育階段的IUGR鼠的腦內(nèi)Nogo-A和NgR的表達(dá)改變情況。
　　 結(jié)果:
　　 1、低蛋白飲食組IUGR發(fā)生率為66.10％(39/59只),明顯高于正常飲食組的15.79％(9/57只),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 2、低蛋白飲食組的死胎率為25.42％(16/59只),明顯高于正常飲食組的7.02％

6、(4/57只),差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 3、正常飲食組仔鼠0天體重為(6.0632±0.6022)g,IUGR組仔鼠0天體重為(4.6261±0.5851)g,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 4、低蛋白飲食組仔鼠0天、7天、14天、21天組的腦重較正常飲食組均顯著降低,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　 5、免疫組化及western-blot結(jié)果顯示IUGR組0天、7天組的腦內(nèi)Nogo-A和NgR蛋白的表達(dá)較CON組(正常對(duì)照