鹽酸戊乙奎醚對LPS致大鼠急性肺損傷后AQP1、AQP5表達的影響.pdf

1、目的:通過測定肺組織濕干重比值（wet/dry，W/D）、肺通透性（pulmonary permeability index，PPI）、超氧化物歧化酶（superoxide dismutase，SOD）活性、丙二醛（malonaldehyde，MDA）含量和水通道蛋白1（aquaporin1，AQP1）、水通道蛋白5（AQP5）表達的變化，以及肺組織病理改變程度，研究不同劑量鹽酸戊乙奎醚（penehyclidine hydrochlor

2、ide，PHCD）對脂多糖（lipopolysaccharide，LPS）所致大鼠急性肺損傷（acute lung injury，ALI）的治療效果及可能的治療機制。 方法:75只健康雄性S-D大鼠，180～200g，自由攝水一周后隨機分為5組（n=15）：正常對照組（C組）、ALI組、鹽酸戊乙奎醚治療組（P組：低劑量PL組、中劑量PM組、高劑量PH組）。采用尾靜脈注射LPS（5mg/kg）建立ALI大鼠模型，低、中、高劑量治療

3、組于10分鐘后分別從腹腔注入鹽酸戊乙奎醚0.05mg/kg、0.15mg/kg、0.45mg/kg；C組尾靜脈注射等量生理鹽水后，10分鐘后腹腔注入生理鹽水1ml。根據(jù)不同的處死時間（2h、6h、12h）再分為3個亞組（n=5）。大鼠麻醉后主動脈取血檢測血漿蛋白含量，收集左肺灌洗液測定其蛋白含量，計算肺通透指數(shù)；右肺上葉行電鏡觀測；右肺中葉行光鏡、免疫組化AQP1、AQP5檢測；右肺下葉測定SOD活性、MDA含量；右肺副葉計算肺濕干重比

4、值。所有實驗數(shù)據(jù)采用SPSS13.0統(tǒng)計軟件進行方差分析，組間比較采用析因分析的方差分析。 結(jié)果: （1）肺組織W/D、PPI值及SOD活性、MDA含量：正常對照組（C組）以上觀測值在2h、6h、12h時無明顯變化（P>0.05）；與C組相比，ALI組、各劑量治療組（P組）2h時W/D、PPI值及MDA含量均升高，SOD活性均降低，12h時變化更加明顯（P<0.05）；與ALI組相比，P組各時間點W/D、PPI值及MDA

5、含量均降低，SOD活性均升高（P<0.05）；高（PH組）、中劑量治療組（PM組）對應時間點與低劑量治療組（PL組）相比有明顯差異（P<0.05），但高、中劑量組間相比無統(tǒng)計學意義（P>0.05）。 （2）肺組織AQP1、AQP5表達：各組肺泡毛細血管內(nèi)皮細胞、肺泡Ⅱ型上皮細胞上可見棕黃色陽性AQP1顆粒，肺泡Ⅰ型上皮細胞上見棕黃色陽性為AQP5表達。C組AQP1、AQP5在2h、6h、12h時表達均無明顯差異（P>0.05）；

6、ALI組以上時間點AQP1、AQP5表達低于P組，表達強度隨時間延長而下降；P組各時間點AQP1、AQP5表達高于ALI組，但低于C組，表達強度隨時間延長而上升（P<0.05）；ALI組AQP1于6h時下降出現(xiàn)統(tǒng)計差異，AQP5于12h時出現(xiàn)統(tǒng)計差異（P<0.05）；P組AQP1于6h時上升有統(tǒng)計差異，AQP5于12h時出現(xiàn)統(tǒng)計差異（P<0.05）；各時間點高劑量治療組AQP1表達高于中、低劑量治療組（P<0.05），中、低劑量組間無統(tǒng)

7、計學差異（P>0.05）；各時間點高、中劑量組AQP5表達高于低劑量組（P<0.05），高、中劑量組間無統(tǒng)計學差異（P>0.05）。 （3）肺組織病理觀察： 大體觀察：C組外觀正常，肺臟顏色粉紅；ALI組肺部均有不同程度的腫脹，表面可見暗紅色點狀或塊狀病灶，切面有淡紅色或白色泡沫樣液體溢出；治療組肺腫脹程度減輕，表面及切面病變部位減少，肺損傷減輕。 光鏡觀察：C組結(jié)構(gòu)正常；ALI組肺泡壁破壞嚴重，肺間質(zhì)、肺泡水腫

8、，肺泡間隔增寬，肺內(nèi)大量多形核白細胞浸潤，肺泡腔內(nèi)可見紅細胞和炎性細胞；PH組肺泡結(jié)構(gòu)尚可，肺間質(zhì)水腫增寬及多形核白細胞浸潤較ALI組明顯減輕。 電鏡觀察：ALI組電鏡下見肺泡Ⅰ型上皮細胞膜連續(xù)性中斷，邊界不清，胞漿空化，核腫脹、溶解甚至消失。Ⅱ型上皮細胞板層小體尚存，但胞漿空化、溶解，毛細血管內(nèi)皮細胞胞漿明顯腫脹；治療組肺泡Ⅰ型上皮細胞腫脹明顯，細胞輪廓尚較明顯，基本結(jié)構(gòu)未見明顯破壞，Ⅱ型上皮細胞內(nèi)板層體比模型組稍增多，偶見板

9、層體排空現(xiàn)象，細胞輕度腫脹，毛細血管內(nèi)皮細胞可見腫脹。 結(jié)論: （1）注射LPS后ALI組隨時間延長肺通透性、含水量增高，肺組織SOD活性下降，MDA含量升高，AQP1、AQP5表達降低，肺組織病理改變逐漸加重，12h未見好轉(zhuǎn)。 （2）不同劑量鹽酸戊乙奎醚治療后，血管內(nèi)皮與肺泡上皮的損傷減輕，肺組織肺通透性、含水量降低，肺組織MDA含量降低、SOD活性增強，AQP1、AQP5表達上調(diào)，肺組織病理改變明顯減輕，12