鹽酸戊乙奎醚預(yù)先給藥對(duì)大鼠橫紋肌溶解致急性腎損傷的影響及其相關(guān)機(jī)制的研究.pdf

1、高強(qiáng)度軍事訓(xùn)練、戰(zhàn)創(chuàng)傷等可導(dǎo)致橫紋肌溶解癥，進(jìn)而導(dǎo)致急性腎損傷，病死率較高。因此，探討橫紋肌溶解致急性腎損傷的致病機(jī)制及其防治措施，具有重大的軍事價(jià)值和臨床意義。本課題組以往研究表明，抗膽堿藥山莨菪堿可通過(guò)改善微循環(huán)、減輕組織氧化應(yīng)激反應(yīng)、抗腎細(xì)胞凋亡等途徑，減輕橫紋肌溶解導(dǎo)致的大鼠急性腎損傷。鹽酸戊乙奎醚(PHC)是一種新型莨菪類(lèi)選擇性抗膽堿藥，同時(shí)具有抗毒蕈堿和抗煙堿作用，目前在國(guó)內(nèi)已廣泛應(yīng)用于麻醉術(shù)前用藥。研究表明，PHC具有減輕

2、組織氧化應(yīng)激、抗細(xì)胞凋亡等作用，其還可改善大鼠腎缺血-再灌注損傷。而PHC是否可減輕橫紋肌溶解導(dǎo)致的急性腎損傷，及其分子作用機(jī)制如何，尚不明確，有待進(jìn)一步研究。
　　目的：本研究擬通過(guò)建立大鼠橫紋肌溶解致急性腎損傷模型，采用PHC預(yù)先給藥的干預(yù)方法，評(píng)價(jià)PHC對(duì)大鼠橫紋肌溶解致急性腎損傷的影響及其相關(guān)機(jī)制。
　　方法：雄性清潔級(jí)SD大鼠90只，體重200～220 g，采用隨機(jī)數(shù)字表法分為5組（n=18）:對(duì)照組（C組），雙側(cè)

3、后肢肌肉注射生理鹽水10 ml/kg;模型組(AKI組)，雙側(cè)后肢肌肉注射50％甘油生理鹽水溶液10 ml/kg;戊乙奎醚預(yù)處理組(PHC組)，甘油肌注30 min前給予腹腔注射鹽酸戊乙奎醚0.2 mg/kg; HO-1抑制劑組(ZnPP組)，甘油肌注24 h前給予腹腔注射ZnPP10 mg/kg;戊乙奎醚預(yù)處理+HO-1抑制劑組(PHC+ZnPP組)，按PHC組和ZnPP組的處理方法分別給予腹腔注射ZnPP和PHC。各組于甘油肌注后1

4、h、6h和24 h時(shí)分別隨機(jī)選取6只大鼠，采集靜脈血樣測(cè)定血清尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)、肌酸激酶(CK)和肌紅蛋白濃度;采集腎組織標(biāo)本，分別行腎組織病理檢查、血紅素加氧酶1(HO-1)活性測(cè)定、免疫組織化學(xué)檢查、原位TUNEL法細(xì)胞凋亡率測(cè)定、RT-qPCR檢測(cè)和Western blotting檢測(cè)。
　　結(jié)果：(1)與C組比較，AKI組各時(shí)點(diǎn)血清BUN、Cr和CK濃度、腎小管損傷評(píng)分升高(P＜0.01);與AKI組比較，P

5、HC組各時(shí)點(diǎn)血清BUN和Cr濃度、腎小管損傷評(píng)分降低(P＜0.01或0.05);與PHC組比較，ZnPP組和PHC+ZnPP組各時(shí)點(diǎn)上述指標(biāo)升高(P＜0.01或0.05);(2)與C組比較，AKI組血清和腎組織肌紅蛋白水平升高，腎組織HO-1活性增強(qiáng)，腎組織核蛋白Nrf2表達(dá)上調(diào)，腎組織HO-1在基因和蛋白質(zhì)水平上表達(dá)上調(diào);與AKI組比較，PHC組血清和腎組織肌紅蛋白水平降低，腎組織HO-1活性增強(qiáng)，腎組織Nrf2和HO-1在基因和蛋白

6、質(zhì)水平上表達(dá)上調(diào);與PHC組比較，ZnPP組和PHC+ZnPP組血清和腎組織肌紅蛋白水平升高，腎組織HO-1活性減低，部分時(shí)點(diǎn)腎組織Nrf2和HO-1在基因和蛋白質(zhì)水平上表達(dá)下調(diào);(3)與C組比較，AKI組各時(shí)點(diǎn)腎細(xì)胞凋亡率升高(P＜0.01），腎組織GRP78和caspase-12在基因和蛋白質(zhì)水平上表達(dá)上調(diào)(P＜0.01);與AKI組比較，PHC組各時(shí)點(diǎn)腎細(xì)胞凋亡率降低(P＜0.01或0.05)，部分時(shí)點(diǎn)腎組織GRP78和caspa

7、se-12在基因和蛋白質(zhì)水平上表達(dá)下調(diào)(P＜0.01）。
　　結(jié)論：(1)橫紋肌溶解可導(dǎo)致大鼠急性腎損傷，PHC預(yù)先給藥可減輕大鼠橫紋肌溶解致急性腎損傷時(shí)的腎功能損害和腎組織病理?yè)p傷;(2)Nrf2/HO-1信號(hào)通路參與了大鼠橫紋肌溶解致急性腎損傷時(shí)腎組織保護(hù)機(jī)制。PHC預(yù)先給藥可通過(guò)激活腎組織內(nèi)Nrf2/HO-1信號(hào)通路，減輕腎組織內(nèi)肌紅蛋白和亞鐵血紅素的蓄積，從而減輕了大鼠橫紋肌溶解導(dǎo)致的急性腎損傷;(3)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激(ERS)