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1、體外受精在醫(yī)學(xué)、生物學(xué)等相關(guān)領(lǐng)域已得到廣泛的應(yīng)用,但是體外受精及受精卵體外培養(yǎng)體系還有待于進一步完善。昆白小鼠是我國自行繁殖的近交系小鼠,由于其遺傳背景清楚、生殖周期短、環(huán)境適應(yīng)能力強等優(yōu)點,是研究哺乳動物體外受精的良好的實驗動物。為了建立更為簡單、高效的體外受精及胚胎培養(yǎng)體系,提高體外受精率和體外發(fā)育的胚胎質(zhì)量。本研究以昆白小鼠為研究對象,從胚胎培養(yǎng)液的篩選、肝素對精子活力的影響、不同獲能液對受精率的影響、不同培養(yǎng)液對胚胎發(fā)育的影響、
2、不同培養(yǎng)體系對胚胎發(fā)育的影響等,5個方面對昆白小鼠體外受精進行了研究。結(jié)果表明: 1.添加10%NBS的KSOM和G1/G2培養(yǎng)液均能較好支持小鼠2-細(xì)胞胚胎發(fā)育到囊胚(89.52%和87.08%)。同時,添加10%FBS組的囊胚率也顯著高于相應(yīng)的添加BSA組(P<0.01)。 2.篩選小鼠精子獲能液中的肝素的最佳添加量。未添加肝素組受精率(41.75%)高于添加1μg/mL、3μg/mL,及5μg/mL組(31.00%
3、、18.80%、22.43%),差異顯著。 3.原裝進口精子獲能液HTF(MR-070)受精率(85.71%)顯著高于自配的三種體外受精HTF、T6、Whittingham的體外受精率(38.58%、10.22%、24.64%)。受精卵培養(yǎng)24h觀察,HTF、T6、Whittingham中碎裂率(23.62%、20.44%、32.61%),顯著高于原裝HTF(3.57%)。 4.G1/G2中培養(yǎng)的體外受精胚胎囊胚率達(dá)到7
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