胃酸和胃內(nèi)細菌的隨齡變化及其與肺部感染關(guān)系的探討.pdf

1、目的：研究大鼠胃內(nèi)pH值的變化與胃及肺部細菌數(shù)量變化的關(guān)系，觀察是否存在大鼠胃內(nèi)細菌到肺部的逆向定植，以及細菌的生長是否能引起大鼠胃及肺部的炎癥反應(yīng)。比較老齡與非老齡大鼠對胃內(nèi)pH值升高所致細菌變化的反應(yīng)。研究人體胃內(nèi)微生態(tài)，人體胃內(nèi)pH值、胃內(nèi)細菌數(shù)量與年齡、萎縮、幽門螺桿菌(Helicobacter pylori，Hp)感染及其他因素的關(guān)系，初步探討胃內(nèi)pH值、胃內(nèi)細菌與肺部感染的關(guān)系。 方法： 1.Wister大鼠

2、40只，3月齡的非老齡大鼠30只，22月齡的老齡大鼠10只。分為非老齡奧美拉唑組，非老齡檸檬酸組，非老齡對照組和老齡對照組，每組各10只。非老齡奧美拉唑組以奧美拉唑灌胃(15mg/kg/d)；非老齡檸檬酸組以相同劑量的奧美拉唑灌胃的同時以檸檬酸(0.1mmol/L)為飲用水；非老齡及老齡大鼠對照組均以等量的生理鹽水灌胃。2周后測大鼠胃內(nèi)pH值，取大鼠胃組織及肺組織做細菌培養(yǎng)，并做胃組織及肺組織病理切片檢查。 2.3月齡非老齡Wi

3、ster大鼠20只，22月齡老齡Wister大鼠12只，各分為2組，老齡、非老齡奧美拉唑組，老齡、非老齡對照組。奧美拉唑組以奧美拉唑灌胃(15mg/kg/d)，對照組以等量的生理鹽水灌胃。第4d開始，連續(xù)10d給大鼠灌飼含質(zhì)粒pGEX-4T-1-EGFP的大腸桿菌(10mL/kg，1次/d)。第14d測胃內(nèi)pH值，取胃及肺組織做細菌培養(yǎng)，并做胃及肺組織的病理切片。應(yīng)用熒光顯微鏡和質(zhì)粒酶切電泳鑒定細菌的來源。 3.選擇69例患者作

4、為研究對象。其中男性53例、女性16例。年齡≥60歲55例，＜60歲14例(男性≥60歲45例，＜60歲7例，女性≥60歲10例，＜60歲7例)。胃鏡下取胃液測胃液pH值，取胃竇及胃體組織，做需氧及厭氧細菌培養(yǎng)，計數(shù)胃組織細菌培養(yǎng)數(shù)量，16SrRNA法鑒定胃組織細菌。胃鏡檢查前詢問病史，檢查術(shù)后電話隨訪患者在胃組織培養(yǎng)前后共半年時間內(nèi)是否有肺部感染發(fā)生。 結(jié)果： 1.與非老齡對照組大鼠相比，老齡對照組大鼠胃內(nèi)pH值、胃及

5、肺部細菌數(shù)量均無明顯差異；與非老齡對照組大鼠及非老齡檸檬酸組大鼠相比，非老齡奧美拉唑組大鼠胃內(nèi)pH值、胃及肺部細菌數(shù)量均有明顯差異；非老齡檸檬酸組胃內(nèi)細菌數(shù)量較非老齡對照組大鼠差異明顯，但胃內(nèi)pH值及肺部細菌數(shù)量無明顯差異；相關(guān)性分析顯示，大鼠胃內(nèi)pH值與胃及肺部細菌數(shù)量正相關(guān)。觀察4組大鼠的病理切片，發(fā)現(xiàn)胃組織均無明顯炎細胞浸潤。非老齡對照組、老齡對照組及非老齡檸檬酸組相似，肺組織均有輕度淋巴細胞浸潤。非老齡奧美拉唑組30％的大鼠肺部

6、炎癥稍重。 2.熒光顯微鏡下觀察大鼠的胃及肺部分離的大腸桿菌，可見明確的綠色熒光。胃和肺部分離出的細菌經(jīng)質(zhì)粒酶切電泳鑒定，可見目的條帶。非老齡奧美拉唑組大鼠胃內(nèi)pH值和胃內(nèi)大腸桿菌數(shù)均高于非老齡對照組，肺部大腸桿菌數(shù)無統(tǒng)計學(xué)差異。老齡奧美拉唑組大鼠胃內(nèi)pH值及胃和肺部大腸桿菌數(shù)均高于老齡對照組。老齡奧美拉唑組大鼠胃內(nèi)pH值及胃內(nèi)大腸桿菌數(shù)與非老齡奧美拉唑組相比無統(tǒng)計學(xué)差異，但肺內(nèi)大腸桿菌數(shù)明顯高于非老齡奧美拉唑組；相關(guān)性分析顯示

7、，大鼠胃內(nèi)pH值與胃內(nèi)及肺部大腸桿菌數(shù)量正相關(guān)。觀察4組病理切片，發(fā)現(xiàn)胃組織均無明顯炎癥。非老齡對照組和老齡對照組相似，肺組織中均有輕度淋巴細胞浸潤。非老齡奧美拉唑組肺部炎癥較老齡奧美拉唑組輕，與對照組差別不明顯，老齡奧美拉唑組中50％的大鼠肺部炎癥較重。 3.Logistic回歸分析結(jié)果表明，需氧條件下，人體胃內(nèi)細菌培養(yǎng)數(shù)量隨胃內(nèi)pH值的增高而升高，而與性別、年齡、糖尿病、Hp感染及萎縮性胃炎無關(guān)。隨胃內(nèi)pH值升高與糖尿病的加

8、重，胃內(nèi)厭氧條件下細菌培養(yǎng)數(shù)增多，如伴有Hp感染，則胃內(nèi)厭氧培養(yǎng)細菌數(shù)減少。年齡越大，患萎縮性胃炎的幾率越大。初步分析人體胃內(nèi)pH值與性別、年齡、糖尿病、Hp感染及萎縮性胃炎無關(guān)。隨訪66例研究對象中，10例有肺部感染，他們胃內(nèi)pH值較高或服用了抑酸藥物。胃內(nèi)共分離出細菌69株，為口咽部和胃腸道常見菌群。老年人胃內(nèi)常見的細菌是：鏈球菌，大腸埃希菌、奈瑟菌；非老年人胃內(nèi)常見的細菌是：鏈球菌和大腸埃希菌。 結(jié)論： 1.大鼠胃

9、內(nèi)pH值與胃及肺部細菌數(shù)量正相關(guān)。隨胃內(nèi)pH值升高，組織學(xué)上肺部炎癥反應(yīng)有所增加。 2.經(jīng)熒光顯微鏡及質(zhì)粒酶切電泳，證實大鼠胃內(nèi)含pGEX-4T-1-EGFP的大腸桿菌可以轉(zhuǎn)移到肺部。老齡奧美拉唑組大鼠肺部的大腸桿菌數(shù)高于老齡對照組和非老齡奧美拉唑組，肺部炎癥反應(yīng)也較重。 3.需氧條件下，人體胃內(nèi)細菌培養(yǎng)的數(shù)量與胃內(nèi)pH值相關(guān)。厭氧條件下，細菌培養(yǎng)數(shù)與胃內(nèi)pH值、糖尿病及Hp感染相關(guān)。胃內(nèi)分離的細菌為口咽部和胃腸道常見菌