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1、目的:自然流產(chǎn)(spontaneouse abortion,SA)是妊娠期常見并發(fā)癥,其發(fā)生率占全部妊娠的10-15%,其中80%以上發(fā)生于妊娠12周以內(nèi),即早期自然流產(chǎn)。妊娠從免疫學(xué)角度看類似于器官移植,帶有父方同種異體抗原的胚胎對母體來說是一個半同種移植物,流產(chǎn)是移植物被排斥的結(jié)果。正常妊娠時,胚胎能夠不受母體排斥而存活,這與母-胎界面微環(huán)境保持平衡有著很大關(guān)系。近來研究表明,許多生物活性物質(zhì)參與調(diào)節(jié)母-胎界面微環(huán)境平衡而維持妊娠。
2、血紅素氧合酶(Heme Oxygenase,HO)及其代謝產(chǎn)物一氧化碳(carbon monoxide,CO)是人體內(nèi)重要的生物活性物質(zhì),表達于子宮內(nèi)膜、蛻膜及絨毛組織。HO表達降低,導(dǎo)致內(nèi)源性CO含量下降,與早期自然流產(chǎn)關(guān)系密切。本研究旨在通過測定正常子宮內(nèi)膜、正常早孕和早期自然流產(chǎn)患者蛻膜、絨毛中HO-1、HO-2的表達情況和CO含量變化及其相關(guān)性,探討其在妊娠維持及早期自然流產(chǎn)發(fā)病中的作用。 方法:資料來源:選自2006.
3、12-2007.9在河北醫(yī)科大學(xué)第二醫(yī)院婦產(chǎn)科門診手術(shù)室行清宮術(shù)、人工流產(chǎn)術(shù)或因不孕行診刮術(shù)患者及婦科病房因單純性卵巢囊腫行卵巢囊腫剝除術(shù)患者。SA組:自然流產(chǎn)≥2次,月經(jīng)規(guī)則,停經(jīng)47-75天因腹痛或陰道出血就診,B超提示胚胎停止發(fā)育,排除染色體、解剖、內(nèi)分泌異常、感染及自身免疫性疾病。正常早孕組:20例,為月經(jīng)規(guī)則,孕49-70天要求人工流產(chǎn)術(shù)的正常妊娠婦女,既往至少有1次正常分娩史,無自然流產(chǎn)、早產(chǎn)、死胎及死產(chǎn)等不良孕產(chǎn)史,人流前
4、均做B超可見胚芽及心管搏動且無任何流產(chǎn)跡象。正常子宮內(nèi)膜組:30例,同期因不孕癥行診刮術(shù)或單純性卵巢囊腫手術(shù)患者,月經(jīng)規(guī)則,術(shù)前6個月內(nèi)未服用過激素類藥物,無急慢性盆腔炎史及其他病史,據(jù)組織病理證實增殖期內(nèi)膜14例,分泌期內(nèi)膜16例。研究對象各組平均年齡,SA組與正常早孕組平均停經(jīng)天數(shù)均無統(tǒng)計學(xué)差異。標(biāo)本采集:SA組和正常早孕組于清宮術(shù)或人工流產(chǎn)術(shù)后留取蛻膜和絨毛組織,正常子宮內(nèi)膜組于診刮術(shù)或卵巢囊腫剝除術(shù)時刮取適量子宮內(nèi)膜組織,所有標(biāo)
5、本均用無菌生理鹽水沖洗干凈,每份標(biāo)本分為兩部分,一部分經(jīng)4%多聚甲醛固定、脫水、石蠟包埋、5um連續(xù)切片備用;另一部分取組織100mg,加入10%預(yù)冷的0.1mol/LKH2PO4/K2HPO4緩沖液制成勻漿,以3000r/min離心15min,取上清-70℃保存待測COHb%。(1)采用免疫組化PV法檢測各組織中HO-1、HO-2的表達情況。(2)采用雙波長定量的方法,將勻漿上清在756M型分光光度計上用420nm和432nm兩個波長
6、測定吸光度,依比爾定律建立綜合方程求出COHb百分含量(X%)。數(shù)據(jù)采用SPSS13.0統(tǒng)計軟件進行統(tǒng)計分析,顯著性水準(zhǔn)為P<0.05。 結(jié)果:1.HO-1在正常子宮內(nèi)膜、正常早孕和早期自然流產(chǎn)患者蛻膜和絨毛組織中均有表達;主要定位于子宮內(nèi)膜腺上皮細(xì)胞、蛻膜腺上皮細(xì)胞、蛻膜細(xì)胞、絨毛間質(zhì)、合體滋養(yǎng)細(xì)胞和細(xì)胞滋養(yǎng)細(xì)胞的胞漿和胞膜,合體滋養(yǎng)細(xì)胞著色較細(xì)胞滋養(yǎng)細(xì)胞強。分泌期宮內(nèi)膜表達HO-1與增殖期宮內(nèi)膜比較差異無顯著性,(P>0.0
7、5);正常早孕組和SA組蛻表達HO-1均高于分泌期宮內(nèi)膜(P<0.01);SA組絨毛表達HO-1明顯低于正常早孕組,差異有顯著性(P<0.05),而蛻膜表達HO-1 SA組與正常早孕組比較,差異無顯著性(P>0.05)。2。HO-2在正常子宮內(nèi)膜、正常早孕和早期自然流產(chǎn)患者蛻膜和絨毛組織中均有表達;主要定位于子宮內(nèi)膜腺上皮細(xì)胞、蛻膜腺上皮細(xì)胞、蛻膜細(xì)胞、合體滋養(yǎng)細(xì)胞、細(xì)胞滋養(yǎng)細(xì)胞、血管內(nèi)皮細(xì)胞的胞漿和胞膜,合體滋養(yǎng)細(xì)胞著色較細(xì)胞滋養(yǎng)細(xì)胞
8、強,絨毛間質(zhì)著色較弱。分泌期宮內(nèi)膜表達HO-2高于增殖期宮內(nèi)膜(P<0.01);正常早孕組和SA組蛻膜表達HO-2均高于分泌期宮內(nèi)膜(P<0.01,P<0.05);SA組蛻膜和絨毛表達HO-2均明顯低于正常早孕組(P<0.01)。3.COHb水平分泌期宮內(nèi)膜組[(0.17±0.07)%]高于增殖期宮內(nèi)膜組[(0.10±0.05)%](P<0.01);妊娠組蛻膜COHb水平(正常早孕組[(0.37±0.08)%]和SA組[(0.23±0.
9、10)%])高于分泌期宮內(nèi)膜組[(0.17±0.07)%](P<0.01,P<0.05);蛻膜及絨毛COHb水平SA組[(0.23±0.10)%、(0.31±0.12)%]均明顯低于早孕組[(0.37±0.08)%、(0.56±0.13)%](P<0.01)。4.SA組蛻膜組織中CO水平與HO-1、HO-2表達均呈正相關(guān),P<0.05,P<0.01;SA組絨毛組織中CO水平與HO-1、HO-2表達均呈正相關(guān),P均<0.01。 結(jié)
10、論;1.HO-1、HO-2表達于正常子宮內(nèi)膜,且分泌期HO-2達增強,COHb水平升高,更好的維護子宮內(nèi)膜功能,促進血管生長和舒張,與子宮內(nèi)膜正常周期性變化相協(xié)調(diào)。2.HO-1、HO-2在蛻膜組織中表達及COHb水平較子宮內(nèi)膜組織升高,提示HO-CO可能與妊娠初期子宮內(nèi)膜蛻膜化及螺旋動脈生理重鑄有關(guān),從而有利于滋養(yǎng)細(xì)胞侵襲子宮蛻膜和胚胎的種植與發(fā)育。3.SA患者蛻膜組織HO-1表達情況與正常早孕組相比無顯著性差異,可能與HO-1受較多因
11、素調(diào)節(jié)有關(guān),SA患者蛻膜組織HO-2表達減弱,提示在保護蛻膜功能方面,HO-2發(fā)揮了較大作用;絨毛組織HO-1、HO-2及COHb水平下降,對胚胎滋養(yǎng)細(xì)胞和血管內(nèi)皮細(xì)胞的保護作用減弱,影響滋養(yǎng)細(xì)胞的侵襲能力和血管的舒張功能,母-胎界面抗炎、抗氧化、抗血小板聚集能力下降,加速母體對胎兒的排斥作用,最終導(dǎo)致流產(chǎn)的發(fā)生。4.SA患者蛻膜及絨毛組織CO水平與HO-1、HO-2表達呈正相關(guān),HO表達降低,分解血紅素產(chǎn)生的CO含量下降,HO-1、H
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