Notch信號(hào)在體外牙髓細(xì)胞分化中的表達(dá)及其調(diào)控的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、該研究分三個(gè)部分進(jìn)行:以體外連續(xù)培養(yǎng)分化、鈣化的人牙髓細(xì)胞為研究對象,首先利用酶動(dòng)力學(xué)法、光鏡、電子顯微鏡、鈣質(zhì)染色等方法對其生物學(xué)特性進(jìn)行研究,確定我們所培養(yǎng)的牙髓細(xì)胞能否向成牙本質(zhì)樣細(xì)胞分化,從而判定此連續(xù)培養(yǎng)系統(tǒng)是否可作為研究牙髓損傷修復(fù)細(xì)胞分化的體外模型;第二步用酶動(dòng)力學(xué)法、MTT比色法研究rhBMP<,2>對連續(xù)培養(yǎng)的人牙髓細(xì)胞生物學(xué)特性的影響,并通過制作大鼠牙髓損傷修復(fù)模型,以免疫組織化學(xué)方法檢測體內(nèi)外牙髓損傷修復(fù)過程中BM

2、P<,2>的表達(dá);在此基礎(chǔ)上,第三步用免疫組織化學(xué)、Westernblot等方法對體外人牙髓細(xì)胞增殖、分化、鈣化過程中Notch<,2>及其配體Delta的表達(dá)進(jìn)行定性及半定量研究,從它們的表達(dá)部位及表達(dá)水平變化探討Notch信號(hào)途徑在牙髓細(xì)胞增殖、分化中的作用,并通過對培養(yǎng)系統(tǒng)中加入的rhBMP<,2>對Notch信號(hào)成員表達(dá)影響的研究,探討Notch信號(hào)途徑與信號(hào)分子rhBMP<,2>的關(guān)系.從信號(hào)分子的作用及細(xì)胞對信號(hào)的反應(yīng)性角度